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第一部分溶瘤腺病毒ZD55携带IFN-β对肝癌的抑制效应 β-干扰素(IFN-β)由于具有较好的抗癌效应而被应用于肿瘤的基因治疗，但由于半衰期短和副作用较多等原因，其应用受到了一定的限制，因此迫切需要设计更好的基因治疗载体，从而降低副作用和增强其疗效。溶瘤病毒载体ONYX-015由于E1B-55kDa的缺失而具有靶向P53缺失的肿瘤选择能力，但主要缺点是对肿瘤的杀伤力较弱。因此，在ONYX-015的基础之上，我们实验室构建了溶瘤腺病毒ZD55载体，这也是E1B-55kDa蛋白缺失的靶向腺病毒载体系统，但比ONYX-015增加了外源基因插入位点，因此可以不仅使病毒载体在肿瘤细胞内特异性增殖及复制，而且同时使外源基因在靶细胞内得到高水平的表达。 在本研究中，我们把IFN-β基因插入ZD55载体，构建成功了ZD55-IFN-β病毒。与作为对照的非增殖病毒Ad-IFN-β相比，IFN-β的基因表达水平由于ZD55载体的增殖而大大提高，而与对照病毒ONYX-015相比，ZD55-IFN-β对肿瘤细胞的杀伤作用由于IFN-β基因的表达而得到了极大的提高。研究表明ZD55-IFN-β病毒对肿瘤细胞（BEL7404等等）具有强大的杀伤作用，而在作为对照的正常细胞内没有观察到明显的细胞毒性，同时动物实验结果表明ZD55-IFN-β病毒对移植肿瘤具有良好的抑制效果。因此重组腺病毒ZD55-IFN-β可以为肿瘤的生物治疗提供有效的新策略。 第二部分hTERT启动子控制的靶向AAV载体的抗肿瘤效应 腺相关病毒(Adeno-associated virus，AAV)因为对人类不致病，免疫原性低，能够长期稳定表达外源基因等特点，而被认为是目前最安全的基因治疗载体之一。然而，AAV载体存在的一个问题是肿瘤靶向性弱，容易对正常细胞造成损害。因此，本研究应用人端粒酶中的逆转录酶(Human telomerasereverse transcriptase，hTERT)启动子构建靶向AAV载体以达到在肿瘤细胞中特异性表达外源基因的目的。IFN-β具有良好的抗癌活性，但是在肿瘤的临床应用中一直存在副作用较强和半衰期短的问题。因此，在肿瘤的基因治疗中需要更好的靶向治疗载体来减弱IFN-β的毒副作用，以及加强其疗效。 针对以上问题，我们构建了靶向腺相关病毒载体AAV-hTERT携带IFN-β，即AAV-hTERT-IFN-β，使治疗基因在肿瘤细胞内高效特异表达。本论文重点研究了AAV-hTERT-IFN-β对肺癌A549细胞株的抑癌效果，实验结果证明AAV-hTERT-IFN-β在体内和体外实验中对肺癌细胞株都有较强的抑制作用。本研究关于肿瘤靶向AAV的载体设计为肿瘤基因治疗的临床研究提供了新策略。