论文部分内容阅读
目的：利用顺铂诱导人肺腺癌A549细胞凋亡制作细胞凋亡模型；在肺腺癌A549细胞化疗模型中,检测18F-ML-10对凋亡细胞特异性的摄取水平;探讨18F-ML-10在健康昆明小鼠中的生物学分布,在荷瘤小鼠行PET显像观察肿瘤部位摄取；并进一步研究18F-ML-10在荷瘤小鼠抗癌治疗中疗效监测的作用,评价其早期监测抗癌治疗后细胞凋亡的可行性。方法：体外培养人肺腺癌A549细胞,经不同浓度和不同时间顺铂作用后,通过Annexin V-FITC/PI定量法检测A549细胞凋亡情况和井型Y探测仪测量18F-ML-10摄取水平；取健康昆明小鼠25只,随机分组,在注射18F-ML-10后不同的时间点检测小鼠各脏器的摄取水平,评价其生物学分布;利用人肺腺癌A549细胞异体移植至BALB/c裸鼠右前肢腋下皮下组织,建立荷瘤小鼠模型,在注射18F-ML-10后不同的时间点将荷瘤小鼠置于Micro-PET显像,测量肿瘤部位的摄取水平；取荷瘤小鼠6只,随机分成对照组和实验组,实验组小鼠置于放疗机上行肿瘤部位照射(5Gy),待24h后注射18F-ML-10行PET显像,观察肿瘤部位18F-ML-10摄取水平。结果：不同顺铂作用剂量导致A549细胞凋亡,顺铂浓度为10μg/ml时凋亡细胞百分比最小值为23.02±3.37%VS对照组0.91±0.33%；顺铂浓度为100μg/ml最大值为37.31±2.48%VS对照组0.91±0.33%,各组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)：不同顺铂作用剂量导致A549凋亡细胞18F-ML-10摄取水平在顺铂浓度为10μg/ml时最小值为1.91±0.21 VS对照组0.07±0.02 %ID/105,在顺铂浓度为100μg/ml时最大值为3.08±0.20 VS对照组0.07±0.02 %ID/105,各组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),A549凋亡细胞百分比和18F-ML-10摄取水平行线性回归分析提示两者线性相关(R2=0.942,P<0.01)。不同顺铂作用时间导致A549细胞凋亡,在12h时凋亡细胞百分比最小值为0.64±0.26 VS对照组1.61±0.61%,在48h时凋亡百分比最大值为63.10±14.00 VS对照组1.61±0.61%,各组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)；不同顺铂作用时间A549凋亡细胞18F-ML-10摄取水平,在12h时最小值为0.07±0.01 VS对照组0.08±0.02%ID/105,在48h时最大值为4.97±1.03 VS对照组0.08 ±0.02%ID/105,各组与对照相比差异均有统计学意义(P<0.05),A549凋亡细胞百分比和18F-ML-10摄取水平行线性回归分析提示两者线性相关(R2=0.988,P<0.01)。在昆明小鼠生物学分布检测,18F-ML-10注射后在血液迅速达到最高浓度,并迅速分布至全身各个器官,主要通过肾脏从尿液中排出体外;荷瘤小鼠在注射18F-ML-10不同时间行PET显像结果显示肿瘤部位摄取水平在60min时间点达到最大值0.28±0.10%ID/g。荷瘤小鼠肿瘤部位放疗后行PET显像提示放疗组肿瘤18F-ML-10值为1.25±0.13%ID/g,T/M为5.95。结论：不同顺铂作用剂量和作用时间在体外诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,其凋亡百分比与剂量、时间成明显依赖关系,18F-ML-10摄取率与凋亡细胞百分比之间有明显的线性关系；经顺铂诱导人肺腺癌A549细胞凋亡检测18F-ML-10摄取率最佳时间为60-90min; 18F-ML-10在昆明小鼠中有着良好的生物学分布,静脉注射后能够快速地分布到全身各个脏器,并在非靶向组织快速地清除;18F-ML-10在荷瘤小鼠中的PET显象能够清楚的显示肿瘤的轮廓,并在肿瘤组织中部分积聚,与对侧的肌肉组织有着良好的T/M值;18F-ML-10监测荷瘤小鼠放疗效果具有一定的可行性。