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目的 近年来的研究表明,C-fos蛋白是中枢神经细胞中最主要的即刻早期基因之一,多种刺激因子均可诱导中枢神经系统中C-fos基因的表达增强。HSP70家族是研究得较为深入的一组热休克蛋白家族,HSP70被认为是损伤后神经组织产生的一种重要的内源性保护因子。甲基强的松龙(MP)是目前临床上治疗急性脊髓损伤的首选药物,早期大剂量使用MP能显著控制急性脊髓损伤(ASCI)后的炎症反应并减轻伤后的继发性损伤。本次实验应用免疫细胞化学方法和图像分析技术研究MP对大鼠ASCI后C-fos及HSP70表达的影响,进一步探讨MP治疗ASCI的作用机制。 材料与方法 本实验选用Wistar雌性大鼠72只(中国医科大学实验动物中心提供),随机分为四组。A组:空白对照组(6只);B组:假手术组(18只);C组:ASCI加NS组(24只);D组:ASCI加MP组(24只)。采用Allen’s打击法建立ASCI模型。D组大鼠分别于伤后15分钟,按首次剂量30mg/kg尾静脉内注射MP,1h后按5.4mg/(kg·h)静滴给药,共23小时;C组在同时间点注射等量生理盐水。B、C、D组分别于伤后1h,3h,6h,1d,2d,3d处死采取脊髓标本,B组每个时间点取3只,C、D组每个时间点各取4只。免疫组化采用SP法,观察各组脊髓组织中C-fos、HSP70阳性反应物的表达。各组各只分别选取6张C-fos、HSP70免疫组化染色切片,所有图像经Metamorph Image System(V 4.6)处理,通过对阳性信号平均积分光密度值(Integrated Optical Density Average,IOD)的分析,测定C-fos及HSP70的表达量。所有指标以均数±标准差((?)±s)表示,采用SPSS 10.0统计软件分析,各时间点组间先行方差齐性检验,组间差异再应用两均数的t检验。