7-O-香叶基槲皮素联合IGF-1R-siRNA对非小细胞肺癌的作用研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leoling819
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目的:以自制的肽型阳离子脂质体CDO14为载体共同荷载7-O-香叶基槲皮素(GQ)和IGF-1R-siRNA构建纳米共转运系统,考察二者协同抗肺癌作用。  方法:(1)在纳米共转运系统的构建中,首先将阳离子脂质体CDO14与GQ复合构建载药脂质体CDO14/GQ,再将CDO14/GQ与IGF-1R-siRNA复合构建纳米共转运系统CDO14/GQ-siRNA;采用激光粒度仪和透射电镜对脂质体及共转运系统进行表征。(2)在体外抗肿瘤作用研究中,采用CCK-8法检测载药脂质体及共转运系统对肺癌A549细胞活力的影响;采用AO/EB染色法及AV-PI双染法检测载药脂质体及共转运系统对A549细胞的促凋亡作用;采用Western blot考察载药脂质体及共转运系统对A549细胞中IGF-1R蛋白以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。(3)在体内抗肿瘤作用研究中,裸鼠皮下接种A549细胞,建立异种移植瘤模型;成瘤裸鼠尾静脉注射载药脂质体及共转运系统,定期测量瘤体积;给药结束后剥取肿瘤,采用Western blot检测肿瘤组织中IGF-1R蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。  结果:(1)在纳米共转运系统的构建中,所构建的载药脂质体CDO14/GQ的粒径在160nm左右,Zeta电位在120mV左右,纳米共转运系统CDO14/GQ-siRNA的粒径在290nm左右,Zeta电位在60mV左右,形貌均匀。(2)在体外抗肿瘤作用研究中,CCK-8结果表明,CDO14/GQ-siRNA对A549细胞的增殖抑制作用强于单独载药脂质体CDO14/GQ和单独复合IGF-1R-RiRNA的CDO14/siRNA;AO/ER及AV-PI染色结果表明,CDO14/GQ-siRNA对A549细胞的促凋亡作用强于CDO14/GQ和CDO14/siRNA;Western blot结果表明,CDO14/GQ-siRNA能下调IGF-1R蛋白表达,下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达,降低Bcl-2/Bax值,其作用强于CDO14/GQ和CDO14/siRNA。(3)在体内抗肿瘤作用研究中,CDO14/GQ-siRNA能够减慢小鼠体内肿瘤的增长速度,下调肿瘤组织中IGF-1R蛋白表达水平和Bcl-2/Bax值,其作用强于CDO14/GQ和CDO14/siRNA。  结论:纳米共转运系统CDO14/GQ-siRNA对非小细胞肺癌A549细胞具有较好的体内外抗肿瘤作用,其荷载的GQ与IGF-1R-siRNA具有协同作用。
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