内皮祖细胞外泌体对2型糖尿病动脉粥样硬化小鼠血管内皮细胞炎症反应和氧化应激的调节作用

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目的:1.探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生是否与血管内皮细胞炎症反应和氧化应激有关。2.探究正常小鼠内皮祖细胞外泌体(endothelial progenitor cells-derived exosomes,EPC-Exos)对2型糖尿病AS小鼠血管内皮的修复作用是否与其对血管内皮细胞炎症反应和氧化应激的调节作用有关。方法:小鼠分为2型糖尿病AS造模组(model,MOD)和对照组(control,CON)。MOD组采用C57背景的自发性2型糖尿病db/db小鼠予以高脂饲料喂养;CON组采用C57小鼠联合基础饲料喂养。喂养14周后,将MOD组小鼠随机分为EPC-Exos干预组(MOD+Exos组)和PBS对照组(MOD+PBS组);CON组小鼠分为EPC-Exos干预组(CON+Exos组)和PBS对照组(CON+PBS组)。1周后处死小鼠,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)比较各组小鼠血清炎症反应指标C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)及氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)表达水平的变化,并用ROS荧光探针比较各组小鼠腹主动脉之间超氧阴离子型活性氧族(reactive oxygen species,ROS)含量的变化。结果:1.ELISA法检测小鼠血清炎症因子表达水平:与CON+PBS组小鼠相比,MOD+PBS组小鼠血清CRP表达显著增加,IL-8也稍有增加,但无统计学意义;与MOD+PBS组小鼠相比,MOD+Exos组小鼠血清CRP,IL-8表达均显著下降。2.ELISA法检测小鼠血清氧化应激指标表达水平:与CON+PBS组小鼠相比,MOD+PBS组小鼠血清SOD表达水平显著增加,CAT表达显著降低,MDA稍有增加,但无统计学意义;与MOD+PBS组小鼠相比,MOD+Exos组小鼠血清SOD与MDA均明显降低,CAT稍有降低,但无统计学意义;与CON+Exos组小鼠相比,MOD+Exos组小鼠血清CAT表达显著降低。3.小鼠腹主动脉ROS荧光探针:与CON组小鼠相比,MOD组小鼠腹主动脉超氧阴离子型ROS含量明显增高;与MOD+PBS组小鼠相比,MOD+Exos组小鼠腹主动脉超氧阴离子型ROS含量明显降低。结论:1.2型糖尿病AS与血管内皮细胞炎症反应及氧化应激密切相关。2.EPC-Exos可减少CRP和IL-8的表达,从而抑制2型糖尿病AS小鼠血管内皮细胞的炎症反应。3.EPC-Exos可减少ROS,并抑制MDA的表达,从而抑制2型糖尿病AS小鼠血管内皮细胞的氧化应激。4.EPC-Exos对2型糖尿病AS血管内皮的修复作用可能与其抑制血管内皮细胞的炎症反应和氧化应激,减少对血管的损害有关。
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