绝经妇女牙周炎患者龈沟液中RANKL/OPG变化的研究

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目的通过收集女性牙周炎及牙周健康者龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF),检测其成分中细胞核因子-КB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)和骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)的含量。比较各组之间的差异,探讨OPG及RANKL与妇女绝经前后牙周炎的关系,对其预防和治疗提供一定的理论依据。方法1不同材料收集龈沟液的比较:用2×10mm长的WhatmanⅠ号滤纸条、10mm长的吸潮纸尖进行实验,将这两种材料通过二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid,BCA)蛋白定量检测试剂盒进行实验,分析二者的自身蛋白含量以及二者进行蛋白吸收后的蛋白洗脱浓度。2实验对象的选择:选取2013年9月至2014年9月就诊于唐山市人民医院口腔科女性患者(年龄在45-65岁之间),其中未绝经健康者30人,未绝经牙周炎者30人,绝经健康者30人,绝经牙周炎者30人。纳入标准:牙体完整,颈部无龋坏,无充填物,牙龈无炎症,健康者检查为牙龈指数(GI)≤1,菌斑指数(PLI)≤1,附着丧失(AL)≤1mm,探诊深度(PD)≤3mm;牙周炎者牙龈指数>1,菌斑指数(PLI)>1,附着丧失≥3mm,探诊深度≥4mm。排除病例标准:有吸烟史者,3个月内有非甾体类抗炎药和其他用药史者,一些系统性疾病,如糖尿病,高血压,心血管疾病,炎性感染性疾病,局部感染,真菌感染,病毒感染,风湿性类风湿性关节炎,其他口腔疾病如其他类型的牙周炎以及近期内做过牙周治疗者。3用吸潮纸尖法提取龈沟液样本,置于-70℃低温冰箱保存。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测龈沟液中RANKL、OPG的含量。4用SPSS17.0软件进行数据分析。结果1不同材料收集龈沟液蛋白含量的比较:30号吸潮纸尖(裁剪成10mm)蛋白含量为0.126±0.006μg/ml,WhatmanⅠ号滤纸条(2×10mm)的蛋白含量为0.123±0.005μg/ml,统计结果无显著性差异(P>0.05)。2不同材料吸收蛋白后蛋白洗脱浓度比较:30号吸潮纸尖(裁剪成10mm)蛋白洗脱浓度为3.494±0.300μg/ml,WhatmanⅠ号滤纸条(2×10mm)的蛋白含量为3.233±0.419μg/ml,统计结果无显著性差异(P>0.05)。3绝经牙周炎组附着丧失4.633±1.129mm,高于未绝经牙周炎组4.033±0.964mm,差异有统计学意义(P<0.05)。4无论妇女是否绝经,牙周炎组GCF中OPG浓度低于牙周健康组,差异有统计学意义(P<0.01);牙周炎组RANKL浓度及RANKL/OPG的比值高于牙周健康组,差异有统计学意义(P<0.01)。5绝经牙周炎组OPG浓度为(64.267±7.332 pg/μl)低于未绝经牙周炎组(71.300±7.292 pg/μl),差异有统计学意义(P<0.01);而RANKL浓度(128.386±12.654 pg/μl)及RANKL/OPG的比值(2.020±0.267)高于未绝经牙周炎组(119.914±15.921 pg/μl,1.700±0.292),差异有统计学意义(P<0.05)。结论1吸潮纸尖及WhatmanⅠ号滤纸都能收集龈沟液样本,但吸潮纸尖使用方便,不易损伤牙龈,更适合收集龈沟液样本。2无论妇女是否绝经,牙周炎组龈沟液的OPG表达降低,RANKL表达升高,二者的不平衡可能是引起牙周炎的重要因素。3绝经牙周炎组的OPG表达较未绝经组低,RANKL的表达及RANKL/OPG的比值较未绝经组高,提示RANKL/OPG在绝经妇女牙周炎的发生发展中起重要作用,RANKL/OPG的表达可以作为绝经妇女牙周炎的一个判断指征。
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