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目的:探讨PTEN的磷酸化修饰是否参与HMGB1诱导的小鼠系膜细胞增殖及其磷酸化修饰的调控机制。方法:1以小鼠系膜细胞（mouse mesangial cell,MMC）为研究对象,100μg.L-1HMGB1为刺激物,分别于刺激0 h、12 h和24 h收集细胞,Western blot技术检测PCNA蛋白表达变化;流式细胞术检测Brd U阳性细胞百分率。2以100μg.L-1HMGB1刺激MMC,分别于刺激0 min、10 min、30 min、60 min和120 min时收集细胞,Western blot技术检测p-PTEN-Ser380、p-PTEN-Ser370、p-S6K-Thr389、S6K蛋白表达。3将常规培养的MMC随机分为对照组（control group）、HMGB1刺激组（HMGB1 group）、HMGB1+空载质粒转染组（H+EV）、HMGB1+PTEN非磷酸化质粒转染组（H+S380A）和HMGB1+PTEN持续磷酸化质粒转染组（H+S380D）,以Brd U掺入结合免疫荧光技术检测Brd U表达;免疫细胞化学技术检测Ki67蛋白的表达。4将常规培养的MMC随机分为control group、HMGB1 group和HMGB1+PF-4708671 group,先加入25μmol.L-1的PF-4708671预处理24 h,再更换为含100μg.L-1HMGB1的培养基,继续孵育10min、30min和24 h,Western blot技术检测p-PTEN-Ser380、p-S6K-Thr389、S6K和PCNA蛋白的表达变化。结果:1 HMGB1能够上调小鼠系膜细胞的增殖水平1.1流式细胞术检测结果显示:与HMGB1刺激0 h组相比,HMGB1刺激12 h组Brd U阳性细胞百分率有所升高,但差异无统计学意义;而HMGB1刺激24 h时,其阳性细胞百分率明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）。1.2 Western blot结果显示:与HMGB1刺激0 h组相比,HMGB1刺激12h组与HMGB1刺激24 h组PCNA蛋白表达明显升高,并且HMGB1刺激24 h时PCNA蛋白表达高于HMGB1刺激12 h时,差异均具有统计学意义（P<0.05）。2 HMGB1诱导小鼠系膜细胞中PTEN（Ser380）发生磷酸化修饰（p-PTEN-Ser380）Western blot结果显示:HMGB1刺激10 min时p-PTEN-Ser380水平升高,30 min达高峰,与对照组相比,差异具有统计学意义（P<0.05）;随后降低,120 min时回落至正常水平;而HMGB1刺激各时间点,PTEN（Ser370）的磷酸化水平（p-PTEN-Ser370）均无明显变化。3 PTEN（Ser380）的磷酸化参与HMGB1诱导的系膜细胞增殖Brd U掺入法细胞免疫荧光检测结果显示:与对照组相比,HMGB1刺激组Brd U阳性细胞百分率明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与HMGB1刺激组相比,HMGB1+空载质粒转染组Brd U阳性细胞百分率无明显变化,HMGB1+PTEN非磷酸化质粒转染组Brd U阳性细胞百分率明显下降,HMGB1+PTEN持续磷酸化质粒转染组Brd U阳性细胞百分率明显升高,差异均具有统计学意义（P<0.05）。免疫细胞化学检测结果显示:Ki67阳性信号主要定位于细胞核,与对照组相比,HMGB1刺激组Ki67阳性细胞百分率明显上调,差异具有统计学意义（P<0.05）;与HMGB1刺激组相比,HMGB1+空载质粒转染组Ki67阳性细胞百分率无明显变化,HMGB1+PTEN非磷酸化质粒转染组Ki67阳性细胞百分率明显下降,而HMGB1+PTEN持续磷酸化质粒转染组Ki67阳性细胞百分率明显上调,差异均具有统计学意义（P<0.05）。4 HMGB1促进小鼠系膜细胞中S6K（Thr389）发生磷酸化Western blot结果显示:与HMGB1刺激0 min组相比,HMGB1刺激10 min后S6K（Thr389）磷酸化水平（p-S6K-Thr389）升高,30 min时有所回落,但仍高于正常对照组,差异均具有统计学意义（P<0.05）,60 min和120 min接近正常水平;HMGB1刺激各时间点,总S6K表达无明显变化。5 PF-4708671能够抑制HMGB1诱导的小鼠系膜细胞中p-PTEN-Ser380、PCNA、p-S6K-Thr389蛋白的表达Western blot结果显示:与对照组相比,HMGB1刺激组中p-PTEN-Ser380、p-S6K-Thr389和PCNA蛋白表达水平明显上调;而与HMGB1刺激组相比,HMGB1+PF-4708671组p-PTEN-Ser380、p-S6K-Thr389和PCNA蛋白表达水平明显下降,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 HMGB1能够促进小鼠系膜细胞中PTEN（Ser380）发生磷酸化修饰;2 PTEN（Ser380）磷酸化修饰参与了HMGB1诱导的系膜细胞增殖;3 HMGB1介导的PTEN（Ser380）磷酸化修饰是通过S6K磷酸化实现的。