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20世纪初感染性疾病曾经是全世界范围内导致死亡的主要原因[1]。抗生素的发现控制了传染性疾病的传播，同时也给人类带来抗药性问题。为了寻找抗生素的替代品，人们寻找了很多有可能的替代物。就目前研究状况，抗菌蛋白类是最有希望的成为下一代抗菌药物的候选物质之一。 本论文采用热灭活的藤黄微球菌诱导草地贪夜蛾细胞系Sf9和Sf21（为Sf9的克隆株）、麻蝇细胞系NIH-SaPe-4等3种离体培养的昆虫细胞，研究了诱导与非诱导条件下细胞生长状况、抗菌蛋白的出现时间、抗菌蛋白的稳定性、抗菌蛋白的分离纯化等。主要结果如下： (1)诱导对NIH-SaPe-4，Sf21和Sf9细胞生长的影响 灭活藤黄微球菌诱导的3种细胞相比于非诱导的细胞，恢复期细胞数量变化不大，但是恢复期时间延长；进入对数期的时间晚于非诱导组，对数期细胞增速小于非诱导组；进入稳定期的时间也比较晚，到达稳定期的时间夜晚于非诱导组；提前进入了衰亡期；培养细胞生命周期短于非诱导组。藤黄微球菌的加入使得3种细胞恢复期延长、对数期减缓、稳定期缩短,衰亡期提前,影响了细胞的生长。 (2)诱导对抗菌蛋白的影响 NIH-SaPe-4细胞在正常培养情况下能够产生抗菌蛋白，这种蛋白对3种革兰氏阳性菌（藤黄微球菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌）具有较强抑菌作用,对2种革兰氏阴性菌（大肠杆菌，绿色脓杆菌）无抑菌活性；灭活藤黄微球菌的加入使得原本产生的抗菌蛋白在产生时间上提前，在产生量上得到了加强。差异检验显示：诱导组和非诱导组的抗菌蛋白活性之间存在显著差异；灭活藤黄微球菌的诱导使得NIH-SaPe-4细胞产生抗菌蛋白的时间提前,活力得到了加强。 Sf21和Sf9细胞在正常培养情况下不能产生抗菌蛋白，但是经过灭活藤黄微球菌的诱导后，培养液中产生了抗菌蛋白；2种细胞产生抗菌肽的时间点都在6-12h之间。 (3)3种细胞抗菌蛋白的稳定性 pH在6-8范围内，藤黄微球菌诱导Sf21和Sf9细胞产生的抗菌肽活性变化不大；pH在5-7范围内，NIH-SaPe-4细胞产生的抗菌蛋白与非诱导组2者抑菌活性变化不大；但是3种细胞抗菌蛋白在pH小于3和pH大于11的极端环境下样品的活性会受到很大的影响,甚至消失。在温度方面，3种细胞抗菌蛋白沸水浴2 h仍然保持较高活性。 3种细胞的抗菌蛋白具有一般抗菌肽和抗菌蛋白的共性,即酸碱相对稳定性和高温稳定性。 (4)抗菌蛋白的分离纯化 灭活藤黄微球菌诱导和非被诱导的NIH-SaPe-4细胞培养物过凝胶柱后均得到4个大致相同的峰，第3个峰均具有抑菌活性；活性峰过反相柱后均可得到3个峰,检测第2个峰均具有抑菌活性。 灭活藤黄微球菌经诱导的Sf21和Sf9细胞上清液过凝胶柱后均得到3个峰，第2个峰具有抑菌活性；第二个峰过反相柱后分别可得到6和7个峰,活性检测分别是第3和5个峰具有抑菌活性；诱导使得Sf21和Sf9细胞产生了抗菌肽。 (5)NIH-SaPe-4细胞抗菌蛋白的Tricine-SDS-PAGE 灭活藤黄微球菌诱导和非诱导的NIH-SaPe-4细胞培养物经过凝胶柱和反相柱分离纯化后，样品进行Tricine-SDS-PAGE。都得到一分子量约为60 kDa抗菌蛋白,但经过藤黄微球菌诱导的条带比非诱导组的宽，比非诱导组的亮。藤黄微球菌的诱导使得这一60kDa的抗菌蛋白表达量得到了加强。