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动脉粥样硬化(Arthrosclerosis,As)是许多心血管病与脑卒中的病理基础。前期血清药理的实验表明土茯苓、祁州漏芦具有抗 As 的作用,但其有效成分(可能包括原型成分、代谢产物、内源性物质)尚未明确。本课题拟以土茯苓、祁州漏芦血清药理的研究结果为基础,对土茯苓和祁州漏芦进行初步的血清药物化学的研究。 目的 1 对土茯苓进行血清药物化学的初步研究。 2 对祁州漏芦进行血清药物化学的初步研究。 方法 1 土茯苓 Beagle 犬血清药物化学的研究 以 Beagle 犬为实验动物,犬给药前取空白血样,单次灌胃给土茯苓药液后,在不同的时间点取含药血样。空白和含药的血样经过处理后,用高效液相色谱仪对各个血样进行分析,比较空白和给药后不同时间点的血样色谱图。实验过程中逐步改进给药量、血样的处理方法以及色谱条件。 2 土茯苓 SD 大鼠血清药物化学的研究 改用 SD 大鼠,动物分为空白组和给药组,空白组给常水,给药组多次给土茯苓药液,乙醚麻醉后腹主动脉取血,血清经处理通过高效液相得到色谱图。分析比较了空白组、给药组、药液对照品和加入药液的空白血样的色谱图,并观察特征峰的光谱图。在此过程中对血样的处理方法和色谱条件进行了优化。 3 祁州漏芦 SD 大鼠血清药物化学的研究 采用 SD 大鼠为实验动物,分为空白组和给药组,空白组给常水,给药组用漏芦提取物配制的药液灌胃,多次给药后取血。所得血清经处理后进行高效液相色谱分析,将空白组、给药组、对照品、加药液的空白血样的色谱图进行对比,在实验过程中改进了血样的处理方法和色谱条件,药液对照样品通过液-质联用仪检测得到一、二、三级质谱数据。 结果 1 Beagle 犬的空白血样和给药血样色谱图比较没有发现明显差异。 2 与大鼠的空白血样对比,土茯苓含药血样的色谱图在保留时间 14.7min 左右出现特征峰。与含药血样的色谱图比较,加入药液的空白血样的色谱图在该保留时间附近也有对应的色谱峰。光谱图显示:两者在该保留时间的色谱峰的紫外最大吸收均在 260nm 左右。 3 改进血样的处理方法后发现:与大鼠空白血样的色谱图比较,土茯苓含药血样的色谱图在保留时间 14.6min 附近出现了特征峰,光谱图显示:该特征峰的最大吸收在 260nm左右。 4 改进色谱条件后发现:与大鼠空白血样的色谱图对比,土茯苓含药血样色谱图中的特征峰在保留时间 20.7min 左右出现。与含药血样的色谱图比较,土茯苓药液的色谱图在保留时间 20.7min 左右也有对应的色谱峰。光谱图显示:两者在该保留时间的色谱峰的紫外最大吸收均在 260nm 左右。 5 与大鼠空白血样的色谱图比较,祁州漏芦含药血样的色谱图在保留时间 9.7min 左右