【摘 要】
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糖尿病是一类高发的以长时间高血糖为特征的代谢紊乱疾病，其中90％为Ⅱ型糖尿病，其主要特征是胰岛素抵抗。一般认为，随着骨骼肌对胰岛素抵抗的发生发展，骨骼肌中葡萄糖代谢和脂类代
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糖尿病是一类高发的以长时间高血糖为特征的代谢紊乱疾病，其中90％为Ⅱ型糖尿病，其主要特征是胰岛素抵抗。一般认为，随着骨骼肌对胰岛素抵抗的发生发展，骨骼肌中葡萄糖代谢和脂类代谢发生异常，导致Ⅱ型糖尿病的症状。线粒体是糖和脂肪进行代谢活动的主要场所，因此对骨骼肌及其线粒体的生物化学研究将为了解Ⅱ型糖尿病分子机制提供线索。 在本实验室的前期研究中，以典型Ⅱ型糖尿病小鼠模型（db/db小鼠）的骨骼肌及其线粒体为研究材料，采用基于定量质谱的iTRAQ方法开展了差异蛋白质组的分析，发现db/db小鼠骨骼肌及其线粒体中大部分蛋白质的丰度并未随糖尿病病变而发生显著性的改变。但是iTRAQ的定量数据强烈提示，糖尿病小鼠骨骼肌线粒体的脂肪酸β氧化通路中大部分酶类的丰度均呈现显著性上调，意味着糖尿病小鼠骨骼肌线粒体的脂肪代谢功能增强。 然而，利用单一方法和单一模型得到的结果并不足够可信。在本研究中，我们采用灵敏度及特异性更高、定量更准确的高通量靶向质谱技术MRM对提纯的三种糖尿病小鼠模型骨骼肌线粒体蛋白质组进行靶向蛋白质的定量检测。结果显示iTRAQ中发现的9个脂肪酸β氧化相关的酶在db/db糖尿病小鼠中均有明显上调。在KO和在由高脂饮食诱导的小鼠（HFDI小鼠）中也各有6个酶的丰度明显上调。 除了在蛋白水平上定量检测并验证了脂肪酸β氧化相关的酶的表达丰度上调外，我们还采用了酶活速率检测方法，比较了db/db糖尿病小鼠和正常对照小鼠骨骼肌线粒体催化脂肪酸底物氧化分解速率的差异。结果表明，糖尿病小鼠的脂肪酸β氧化的酶活速率有明显升高。 上述研究结果表明，糖尿病小鼠的骨骼肌中脂肪酸β氧化功能显著活跃，这可能是Ⅱ型糖尿病骨骼肌病变的重要分子标志事件。
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