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目的:本研究应用彩色血管能量成像(colorpowerangiography,CPA),三维彩色血管能量(three-dimensional,3D-CPA)技术,检测肾癌血供情况,计测超声评价肿瘤血管的定量指标彩色血流平均密度(meancolorvesseldensity,MCVD)、血管指数(vascularityindex,Ⅵ);应用肾癌术后组织标本HE染色确定其病理组织学分级,分为Ⅰ~Ⅲ;应用抗CD105、CD34单克隆抗体对肾癌术后组织标本行免疫组织化学染色,计测微血管密度(microsvesseldensity,MVD);将病理组织学分级与术前宏观评价肾肿瘤血供情况的超声定量指标MCVD、VI及术后微观评价肾肿瘤血供情况的定量指标MVD进行对比;探讨MCVD、VI与病理组织学分级、微血管密度的相关性,评价MCVD、VI在肾癌的术前诊断、手术方案的选择、估测疗效及预后等多方面的临床应用价值。
方法:50例肾癌患者为我院2001年3月~2004年10月间拟行手术治疗的住院病人,术前均未行放疗及化疗。所有病例检查前禁食12小时,取平卧位或侧卧位。二维灰阶常规检查肿瘤位置、大小、形态、内部回声及其与周围组织的关系。测量肿瘤的最长径与最短径,以二者平均值作为肿瘤的直径(D),按V=4/3π(D/2)3计算肿瘤体积(cm3)。常规显示下腔静脉、肾静脉,观察其内有无瘤栓、肾门及大血管旁有无淋巴结转移。应用CPA显示50例肾癌血供情况,观察血管走行、分布特征,选择满意图像MO存储,输入计算机,应用AutoCAD软件计算MCVD。在CPA图像清晰的情况下,嘱患者屏气,启动3D键对肿瘤血管进行三维重建,图像存储MO以进一步观察肿瘤血管的整体分布,计测3D-CPA基础上评价肿瘤血管定量指标VI。肿瘤实际体积按总体积减去液化坏死区体积计算。术后肿瘤组织切片HE染色确定其病理组织学分级,行免疫组织化学染色测定其MVD值,血管内皮细胞标记物分别为抗CD105、CD34单克隆抗体。将上述结果进行对比分析。
结果:150例肾癌术后病理证实45例肾腺癌,其中31例透明细胞癌;4例移行细胞癌;1例髓质癌;病理组织学分级Ⅰ级13例;Ⅱ级26例;Ⅲ级11例。男35例,女15例,年龄17~79岁,平均(53.65±12.27)岁。250例肾癌病例切片用免疫组织化学方法标记肿瘤组织血管内皮细胞全部着色,可见着色微血管形态不规则,分布不均,排列杂乱。CD34在肿瘤组织的微小血管及大血管上表达较强,将肿瘤组织标本染成棕色,与其它组织分界清晰,在正常组织中也有表达。抗CD105单克隆抗体只将肿瘤组织微血管染成棕色,大血管不染色,在肿瘤组织边缘染色明显,与其它组织分界清晰,在正常组织中不表达。故本课题选用CD105作为肾癌血管内皮细胞的标记物。350例肾癌各病理组织学分级CD105标记的MVD均数分别为(33.59±10.47)/400倍视野、(45.13±13.68)/400倍视野、(55.39±17.67)/400倍视野。(4)50例肾癌患者MCVD与MVD呈正相关(r=0.480,P<0.05),VI与MVD呈正相关(r=0.554,P<0.05)术后病理组织学分级Ⅰ-Ⅲ级,各病理组织学分级的MCVD、VI及MVD组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(5)50例肾癌各病理组织学分级MCVD均数分别为0.14±0.09、0.23±0.07、0.33±0.11。Ⅵ均数分别为(0.19±0.06)条/cm3、(0.26±0.08)条/cm3、(0.33±0.07)条/cm3。将肾癌各病理组织学分级之间的MCVD及VI进行方差分析,结果表明各病理组织学分级之间MCVD、VI比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:1用抗CD105单克隆抗体对肿瘤血管内皮细胞进行免疫组织化学染色较抗CD34单克隆抗体更敏感,更能突出显示较小的、不成熟的微血管,以其计数的MVD反映了肾癌新生血管的状况。250例肾癌患者MCVD与MVD呈正相关,VI与MVD呈正相关。3随肾癌病理组织学分级的增高,MVD值增加,MCVD值增加,VI值亦增加。应用多普勒超声技术评价肾癌血供情况的定量指标MCVD、VI能客观显示不同病理组织学分级肾癌的血管分布情况,可作为肾癌诊断、治疗及判断肾癌预后的指标。