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中药知母为百合科(Liliaceae)知母属多年生草本植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎，味苦、甘，性寒，归肺、胃、肾经。知母具有清热泻火、生津润燥的功效，中医用于治疗高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热等症。已有的化学成分和药理研究表明，知母中含有甾体皂苷、黄酮、木脂素等多种成分，其中甾体皂苷具有抗血小板聚集、改善学习记忆、降血糖、抗肿瘤等多种药理活性。 本文利用UPLC/Qtof MSE技术，对知母根茎和知母须根中的甾体皂苷进行分析表征和快速鉴定。从知母根茎中分析鉴定了20种甾体皂苷，包括3个新的甾体皂苷和4个首次从知母中发现的甾体皂苷；从知母须根中分析鉴定了7种甾体皂苷。通过知母须根与根茎的UPLC/Qtof MS的指纹图谱表征和对比分析，寻找并鉴定了知母须根与根茎中差异较大的12种甾体皂苷。 液质分析结果显示，知母根茎中仍然有新的甾体皂苷成分值得深入研究。本实验运用多种分离手段以及HRESI-MS、1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、HSQC、HMBC、ROESY等多种波谱技术，从知母中分离、鉴定了16个单体化合物，其结构分别为：(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋甾-3β，12β，22α，26-四醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷（1）、薤白苷J（2）、25R-知母皂苷BⅡ（3）、25S-Officinalisnin-I（4）、知母皂苷H1（5）、知母皂苷H2（6）、原去半乳糖替告皂苷（7）、知母皂苷BII-a（8）、25R-知母皂苷BⅡ-a（9）、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25S)-5β-22-甲氧基-呋甾烷-3β，26-二醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷（10）、5β-变形螺甾烷-3β，15α，23α-三醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷（11）、marcogenin-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(12)、知母皂苷Ⅲ（13）、(5β,17α)-△16(17)-烯-20-酮-孕甾烷-2β，3β-二醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D吡喃半乳糖苷（14）、知母孕甾烷A（15）和一个苯酰酮类化合物（16）。其中化合物1、10、11、14为新的甾体皂苷，化合物3、7、8、9为首次从知母中分离得到的甾体皂苷。