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IL—27是近几年发现的一种新的IL—6/IL-12家族的细胞因子，由于其独特的多效性的生物学功能，成为近年来研究的热点。
IL—27是由P28和EB I3组成的异源二聚体，主要由抗原提成细胞(APCs)产生：IL—27受体有WSX-1/TCCR和gp130组成。IL—27通过与其相应的受体结合从而发挥其生物学功能。IL—27具有多种生物学作用，在Th1反应的早期阶段，IL—27可诱导初始CD4+T细胞向Th1细胞分化而促进Th1型免疫的发生；在Th1反应的晚期，IL—27也可以通过抑制已分化成熟的极化CD4+T细胞的增值而对Th1型免疫发挥负调控作用。同时IL—27可以抑制Th2和Th17的分化，并诱导B细胞的重排，在抗感染免疫、抗肿瘤免疫及自身免疫性炎症等方面发挥重要作用。
IL-10被认为是一种具有广泛免疫调节功能的潜在性的抗炎因子之一。在IL—27对Th细胞介导的抑制性炎症反应中，IL-10作为IL—27产生的效应分子完成“下调”功能。IL-10来源广泛，可以由多种免疫细胞产生，但效应性CD4+T细胞是免疫调节分子IL-10主要的来源。
目前，对IL—27生物学功能研究的结论主要来源于动物实验，且大多数只是IL—27对Th1细胞的生物学功能研究。鉴于此，本课题主要研究目的是：观察IL—27对正常人外周血PBMCs和新生儿脐带血CBMCs中各T细胞亚群的牛物学功能。我们的结果表明：IL—27可以诱导正常人外周血PBMCs和新生儿脐带血CBMCs中的初始CD4+T细胞分化为一群能够同时产生IL-10和IFN—γ两种不同类型细胞因子的细胞亚群。
目的：
探讨IL—27诱导正常人外周血PBMCs及新生儿脐带血CBMCs中初始CD4+T细胞产生IL-10和IFN—γ的作用。
方法：
(1)肝素抗凝血用密度梯度离心法分离，获得正常人PBMCs，加anti—CD3/anti—CD28共培养细胞，再加入不同浓度的IL—27，用ELISA方法检测培养上清中IL-10和IFN—γ产生的量，观察IL—27对PBMCs产生IL-10和IFN—γ的影响。
(2)从新生儿脐带血获得的CBMCs用上述方法培养，3天后收集细胞上清，用ELISA方法检测培养上清中IL-10和IFN—γ产生的量，观察IL—27对CBMCs产生IL-10和IFN—γ的影响。
(3)用磁珠分选法分离正常人PBMCs中的CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD45RA+T细胞、CD4+CD45RA—T细胞、CD8+CD45 RA+T细胞和CD8+CD45RA—T细胞以及新生儿脐带血CBMCs中的CD4+T细胞，用anti—CD3+anti—CD28包被的磁珠微粒(beads)和不同浓度的IL—27，孵育3天后用ELISA方法检测培养上清中IL-10和IFN—γ产生的量，观察IL—27对各T细胞亚群产生IL-10和IFN—γ的作用。
(4)用六孔板培养初始CD4+T细胞，用anti—CD3+anti—CD28包被的磁珠微粒(beads)刺激细胞，加或不加IL—27。孵育48h后收集细胞上清，低浓度IL—2休息细胞48小时后，再次用PMA+ionomycin刺激细胞48小时，ELISA方法检测两次培养上清中IL-10和IFN—γ产生的量，观察IL—27对初次和再次培养后初始CD4+T细胞产生IL-10和IFN—γ的作用。
(5) PBMCs加入anti—CD3/anti—CD28共培养，加或不加IL—27。使用流式细胞术在单个细胞水平上评价IL—27对细胞内细胞因子IL-10和IFN—γ表达的影响。
(6)用磁珠分选的方法分离新生儿脐带血CBMCs中的初始CD4+T细胞，采用与(4)相同的培养方法，使用流式细胞术在单个细胞水平上评价IL—27能够诱导初始CD4+T细胞分化并产生IL-10和IFN—γ的能力。
结果：
(1)在anti—CD3/anti—CD28存在的情况下，IL—27能够呈剂量依赖性的诱导正常人PBMCs IL-10的产生，同时抑制IFN—γ的产生。
(2) IL—27能够剂量依赖性的诱导CBMCs产生IL-10和IFN—γ两种不同类型的细胞因子。
(3) IL—27主要促进PBMCs中CD4+T细胞产生IL-10，并抑制IFN—γ的产生；不能诱导CD8+T细胞产生IL-10，且对IFN—γ的产生无统计学意义。
(4) IL—27能够诱导PBMCs和CBMCs中的初始CD4+T细胞分化为一群能够同时产生IL-10和IFN—γ的细胞亚群；而对记忆性CD4+T细胞亚群IL-10和IFN—γ的产生无统计学意义。
结论：
本研究证明了IL—27能够以剂量依赖方式诱导正常人PBMCs中IL-10的产生，并同时抑制IFN—γ的产生。ELISA结果和流式结果分析一致，均显示IL—27主要诱导CD4+T细胞产生IL-10，同时抑制IFN—γ的产生；而对CD8+T细胞无统计学作用。进一步的研究显示，IL—27可以诱导PBMCs和CBMCs中初始CD4+T细胞的分化为能够同时表达IL-10和IFN—γ两种不同类型细胞因子的细胞亚群。而这种能够同时产生IL-10和IFN—γ两种细胞因子的细胞在免疫应答中可能起到十分重要的调节作用。