松脂醇二葡萄糖苷降压作用及机制研究

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松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinol diglucoside,PDG)是杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)中的木脂素类成分,1976年Sih在其分离并合成PDG的文章中提及其具有降压活性,此成为多数研究者讨论PDG活性所引用的基础文献,至今PDG的降压作用和机制并未见全面和深入报道。本论文分别采用正常动物、模型动物、离体器官,在整体和离体水平研究了 PDG不同给药方式、给药周期对于血压的调节作用并探讨其机制,同时考察了 PDG对缺氧复氧损伤的心肌细胞保护作用,为PDG的抗高血压和缺血保护的临床应用提供依据。1.分别给予正常雄性SD大鼠尾静脉注射25mg/kg、50mg/kg、100mg/kgPDG,于颈总动脉插管连接换能器,监测给药后2 h内血压及心率,结果给药前后SD大鼠的血压及心率均无显著差异,说明PDG对正常动物的血压无影响。2.分别采用灌胃(12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg)和腹腔注射(4.4mg/kg、8.8mg/kg、17.6mg/kg)两种给药方式给予SHRPDG,于尾动脉处监测单次给药后血压及心率的变化,结果PDG经肠道和非肠道两种不同的吸收方式,均能在2h内降低SHR血压,灌胃50 mg/kg PDG最大降幅为25 mmHg,腹腔注射17.6 mg/kg PDG最大降幅为26 mmHg,对心率无影响。3.分别给予不同组SHR腹腔注射4.1 mg/kg、8.2 mg/kg、16.4 mg/kgPDG,每天1次,连续4周,定期监测血压和心率,从给药后第2周开始PDG各剂量组SHR的血压稳定下降,最大降幅为30 mmHg;给药4周后与模型组左心室厚度相比(3.39±0.74 mm),各剂量PDG均可明显降低SHR左心室厚度与正常WKY动物值(2.79±0.21)无差异;病理切片显示PDG组SHR的心肌细胞的直径变小、肌原纤维变细,提示PDG能对抗高血压引起的心肌细胞肥大,扭转左心室肥厚;酶联免疫检测结果表明PDG能够显著减少SHR血清中肾素的合成和分泌,增加一氧化氮的含量,减少血管紧张素Ⅱ的含量,并降低血清中总胆固醇,对心率、血糖、蛋白质代谢、脏器指数、肝功能、肾功能、血清离子水平、尿量等均无影响。4.分离SD大鼠和给予PDG4周的SHR的肠系膜上动脉血管,给予60mMKCl进行预收缩,累积加入的10-9-10-4mol/L的PDG进行干预,与空白对照血管相比SD大鼠和SHR的离体肠系膜上动脉血管张力无显著变化。表明无论对于正常动物还是高血压模型动物,PDG均不能直接作用于内皮功能正常的血管平滑肌对抗KC1引起的收缩。5.培养原代乳鼠心肌细胞,分别给予1.8μmol/L、7.3μmol/L、29.3μmol/LPDG同时进行缺氧6 h复氧12 h,MTT法监测缺氧复氧后细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,结果与对照相比,7.3 μmol/L和29.3 μmol/L PDG均能够显著增强心肌细胞活性,降低心肌细胞的凋亡率。研究表明PDG通过调控RAAS系统中RA的合成和分泌,减少Ang Ⅱ的含量,缓解血管收缩,增加NO含量,促进血管舒张,特异性降低SHR收缩压和舒张压,腹腔注射起效剂量为4.1 mg/kg,对脉压差和心率无影响,对正常动物血压无影响,并且PDG可能具有对抗心肌缺血、维持心脏功能的潜力,表明PDG是一个高效、安全的天然降压活性成分。
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