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人类免疫缺陷病毒1型属于高变异和高重组力的逆转录病毒。目前全球AIDS的流行主要为M群造成，其主要包括11个亚型和51种流行重组型(CirculatingRecombinantForms，CRFs)。分析51种CRFs发现，有些亚型比其它亚型更容易参与到CRFs中，暗示不同亚型HIV-1可能具有不同的重组潜力。众所周知，不同亚型共/超感染是重组发生的前提。为检测不同亚型的共/超感染能力是否存在差异，我们建立了一种可以检测HIV-1不同亚型共/超感染潜力的方法，即构建六种不同HIV-1亚型(A、B、C、D、G、CRF-01_AE)囊膜蛋白的重组载体。此外，我们还经俄亥俄州大学武力教授馈赠获得分别携带红色荧光蛋白(Redfluorescentprotein，RFP)和绿色荧光蛋白(Greenfluorescentprotein，GFP)并缺失Env及Nef的HIV-1缺陷型载体(pHIV1-eGFP/pHIV1-RFP)。通过将囊膜蛋白表达载体与HIV-1缺陷型载体共转染HEK293T细胞，包装出12种单次感染的HIV-1假病毒颗粒。将假病毒颗粒浓缩，感染2×104HUT/CCR5细胞，72小时后通过荧光显微镜观察和流式细胞仪检测，发现20-30％的细胞呈现荧光。为验证假病毒颗粒是否可用于共感染潜力分析，分别随机选取携带GFP或RFP不同亚型的HIV-1单次感染假病毒颗粒感染2×104HUT/CCR5细胞，72小时后，荧光显微镜下观察发现，各亚型均呈现出不同程度的双感染细胞，表明这些细胞会被两种病毒粒子所感染。为继续验证假病毒颗粒是否可以对超感染进行研究，分别选取共感染中所用亚型携带GFP的HIV-1单次感染假病毒颗粒感染HUT/CCR5细胞，8小时后加入带有RFP的另一亚型假病毒颗粒再次感染，72小时后通过荧光显微镜观察发现，相比于共感染，在2个超感染处理组中未发现双感染细胞，其他亚型间均存在超感染现象。这些结果显示，我们所建立的方法可以用于检测HIV-1共感染及超感染的潜力。
从1983年发现至今，AIDS已在全球范围内流行了30年，但是，到目前为止没有一种疫苗能够激发机体产生有效的免疫。我们设想使用一种带有毒素蛋白的逆转录载体来研制治疗性HIV-1疫苗，当这种载体转染细胞之后，会表达毒素蛋白并且降解HIV-1基因组RNA。MazF是大肠杆菌中可以特异切割mRNA中的ACA位点的一种毒素蛋白，在HIV-1基因组中有超过240个ACA位点，因此，HIV-1基因组所编码的mRNA也能被MazF有效剪切。所以对于制备治疗性HIV-1疫苗，MazF是一个很好的备选蛋白。由于MzaF能剪切自身编码的mRNA，因此为了提高MazF的表达量，我们对mazF基因中的9个ACA位点进行同义突变。克隆至pET28a载体中，转化进入大肠杆菌BL21菌株中，筛选出阳性克隆并测序正确。IPTG诱导后经SDS-PAGE分析发现，在约13kDa处能观察到MazF的表达。诱导表达的蛋白经Ni-NTA柱纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔，获得MazF蛋白的多克隆抗血清，通过免疫印迹法分析，证实MazF多克隆抗血清制备正确。