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目的:
肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor，TNF-α)是调节细胞生长、分化、诱发炎症并调控细胞凋亡的细胞因子之一。核因子-kB(nucleartranscriptionfactor-kappaB，NF-kB)是一个重要的核转录因子，在肝细胞、HSCs、内皮细胞中都能检测到其表达，核因子-kB具有多向性的调节作用，可以调控多种细胞因子的转录，阻止HSCs的凋亡。本实验是研究TNF-α介导的NF-kB在大鼠肝纤维化中的表达及中药肝复康的干预作用，并探讨其作用机制。为肝纤维化的治疗提供一种新的可行性理论依据和实验基础。
方法:
整体实验:健康SD大鼠随机分为五组:正常对照组(C)、模型组(M)、肝复康治疗组（高、中、低剂量组）。除正常对照组外，其余大鼠造模，皮下注射橄榄油稀释的10％CCl4（5ml/kg），2次/周，共12W，复制肝纤维化模型。正常对照组以同样的方法注射等剂量的生理盐水。第12W末，处死正常对照组以及模型组大鼠。迅速取出肝组织备用。肝复康治疗组（高、中、低剂量）在造模的第9W开始以3215mg/kg.d、312.5mg/kg.d、31.25mg/kg.d剂量的肝复康煎剂灌胃12W。第20W末，处死其余各组大鼠，迅速取出肝组织备用。
离体实验:大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)复苏后接种于DMEM培养基中，在37℃含5％CO2孵箱中培养，传代。当细胞生长处于良好状态后，在不含胎牛血清的DMEM培养基中继续培养24小时后，将细胞随机分为3组:正常对照组:含10％正常大鼠血清的DMEM细胞培养基;乙醛刺激组:10％正常大鼠血清的DMEM细胞培养基中加入乙醛（终浓度200μmol/L）;肝复康中剂量治疗组:含10％中剂量的药物血清DMEM细胞培养基中加入乙醛（终浓度200μmol/L）。以上3组细胞均在37℃含5％的CO2孵箱中培养48小时。
HE染色观察肝组织形态结构变化，免疫组织化学和免疫蛋白印迹法(Western-Blot)在蛋白水平检测肝组织和肝星状细胞中各组TNF-α的表达，逆转录-聚合酶链式反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT-PCR)在基因水平检测肝组织和肝星状细胞各组TNF<，IkB激酶IKK-α，NF-kB的抑制蛋白IkB-α，NF-kBP65的表达。
结果:
1.肝组织形态学的变化:HE染色肝组织切片显示，与正常组相比，模型组大鼠肝组织结构破坏，肝细胞发生严重的脂肪变性，坏死，凋亡，并有大量炎症细胞的浸润;肝小叶结构破坏，假小叶形成，纤维间隔增宽;而肝复康（高、中、低剂量）治疗组的肝纤维化均得到不同程度的改善。中剂量治疗组效果最为显著。
2.免疫组织化学和Western-Blot结果显示:TNF-α在正常大鼠肝组织几乎不表达，而模型组有显著阳性表达(P＜0.01);与模型组相比，肝复康高、中、低治疗组TNF-α阳性表达明显减少，中剂量治疗组效果最为显著(P＜0.05)。
3.RT-PCR结果显示:与正常组相比，TNF-α，IKK-α，NF-kBP65的基因表达在模型组明显上调(P＜0.01)，与模型组相比，肝复康治疗组的各基因表达水平明显降低，中剂量治疗组最显著(P＜0.01)，其中IkB-α表达成相反趋势。TNF-α和NF-kBP65的表达成正相关，和IkB-α的表达成负相关。
结论:
1.TNF-α介导的NF-kB信号转导通路在肝纤维化的发生和进展中起到促进的作用。
2.肝复康对肝纤维化有显著地治疗作用，其作用机制可能是通过抑制TNF-α介导的NF-kB信号转导通路发挥抗纤维化的作用。