探究WRKY70在拟南芥先天性免疫中的生物功能

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生物进化的规律是:从古老的物种到高级的物种,生命活动的调控水平逐渐增强。换句话说,随着物种演化,新在转录、翻译、表观遗传等不同水平行使调控功能的基因会出现和增多。拟南芥基因组序列的分析结果显示,只有8%-23%的与转录相关的蛋白能在其他真核生物基因组中找到同源体,反映了在拟南芥中很多转录因子是独立进化来的。WRKY蛋白是一类转录因子家族,其序列特征为N端保守的WRKY结构域,迄今为止只在植物中发现这类蛋白。研究显示,WRKY蛋白参与了许多生理过程的转录重编程,包括植物的免疫、发芽、衰老、抗逆性等。  在拟南芥中,SNC2(RLP51)编码一种受体样蛋白,它的突变能激活组成型的免疫反应。遗传上位分析显示,SNC2的下游信号通路的组分可能与其他的NB-LRR型的R蛋白截然不同。这里,通过对snc2-1D的抑制子筛选,得到了一种能抑制snc2-1D介导的抗性的新突变体,命名为bda2-1。对bda2-1进行图位克隆后发现,该基因编码WRKY转录因子家族的一个成员——WRKY70。Bda2-1的点突变位于第一个外显子区,导致第101位的甘氨酸突变成了谷氨酸,暗示了这个氨基酸在蛋白功能上的重要作用。然而,在细菌诱导下,双突变体wrky70/npr1的PR-2表达水平和P.s.m.ES4326生长水平与nprl类似,表明WRKY70可能不参与独立于NPR1蛋白的免疫反应。三突变体wrky70/sncl/nprl和wrky70/sncl/nprl在未受诱导下的PR-2表达水平印证了这一点。Wrky70和wrky70/nprl都不受H.a.Emwa的侵染,表明WRKY70可能不参与RPP4介导的对这种病原卵菌的免疫反应。酵母双杂交实验发现WRKY70与两个MPK蛋白(MPK3和MPK6)没有相互作用。
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