家蚕蜕皮触发激素及其受体基因的克隆和表达分析

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:manaijin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究基于家蚕全基因组序列,利用RT—PCR技术和原位杂交技术对家蚕BmETH基因和BmETHR基因进行了克隆和表达特征分析。主要获得的结果如下: 1.获得了家蚕BmETH和BmETHR基因的全长ORF和相关的基因组结构信息。 BmETH基因的ORF长为303bp,由2个内含子和3个外显子构成,编码100个氨基酸,蛋白预测分子量11.49 kD,等电点是7.51。BmETH编码的第1到15个氨基酸为信号肽。多序列比对结果表明,昆虫ETH基因在昆虫进化过程中分化较明显。聚类分析显示,黑腹果蝇和埃及伊蚊两个双翅目(Diptera)昆虫的ETH基因聚成一类,烟草天蛾与家蚕两个鳞翅目(Lepidoptera)的ETH基因聚成一类,而蜜蜂和丽蝇蛹集金小蜂两个膜翅目(Hymenoptera)的ETH基因聚为一类。 BmETHR基因ORF长810bp,无内含子,共编码269个氨基酸,蛋白预测分子量31.07kD,等电点是9.91。BmETH编码的氨基酸序列中,31-53和68-90位区域为两个跨膜区。蛋白质序列含有跨膜结构域区提示它可能作为膜受体起作用,也可能是定位于膜的锚定蛋白或者离子通道蛋白。多序列比对结果表明,ETHR蛋白序列在昆虫的进化过程中比较保守,烟草天蛾和家蚕两个鳞翅目昆虫的ETHR基因的进化关系最近。 2.BmETH基因及其受体BmETHR基因的表达特征分析。 利用RT—PCR技术,我们分析了BmETH基因和BmETHR基因在胚胎期,幼虫期,变态期以及幼虫5龄3天各个组织中的表达情况。结果表明,胚胎发育期间,BmETH基因在产卵后3天开始表达,在产卵后4天、5天、6天、7天、8天和9天,表达量逐渐提高,而在孵化时的表达量又开始降低。在幼虫生长发育中,BmETH基因几乎都是在每个龄期蜕皮前上调表达;在变态发育过程中,BmETH在吐丝前、化蛹前和化蛾前上调表达。BmETH的时期表达特征暗示其与胚胎形态发生及幼虫或蛹期蜕皮紧密相关。在幼虫5龄3天各组织中,BmETH基因仅在气管、丝腺、精巢和中肠等组织中高量表达,这与其他昆虫中.ETH基因仅在气管中高量表达的特征有些差异。 在不同发育阶段,BmETHR的表达一般随BmETH的表达量变化发生一定程度的变化,提示其与ETH的信号传导相关;但是,BmETHR在胚胎发育早期也有表达,而在幼虫5龄3天的丝腺和中肠组织中低量表达,与ETH的表达并无相关性,暗示其可能不受ETH的调节。 此外,我们利用在家蚕中已建立的组织原位杂交技术,对家蚕.BmETH基因在气管中的表达进行了组织定位,结果表明家蚕BmETH基因在气管丛附着的气门上腺中的Inka细胞中表达。
其他文献
随着模具行业的复苏和产品零件的千变万化,数控加工是保证零件形位公差必不可少的工具,而程序又是加工的先决条件,因此,提高数控程序的编制质量和效率对于提高制造企业的竞争力有
随着社会的进步和经济的高速发展,为满足居住、办公、商业和停车场等的需要,地下工程在高大建筑和地铁等方面应用已十分普遍。这样深基坑支护工程便成为重要且关键的分部工程
马铃薯是典型的喜钾作物,对钾肥的需求量较大。在内蒙古地区马铃薯生产中施钾不足和过量施钾的现象普遍存在。为此,了解马铃薯的钾素营养特点,确定马铃薯钾素的最适用量至关
  可穿戴设备顾名思义就是可直接穿在我们的身上,或是整合到用户的衣服或配件的一种便携式设备。可穿戴设备不仅仅是一种硬件设备,更是通过软件支持以及数据交互、云端交互来
郑州市地处黄河中下游,市区水厂水源主要取自黄河地表水和黄河侧渗地下水,目前各水厂在制水过程中均存在着生产排泥水未经处理直接排入水域的问题,水厂生产排泥水没经处理长期直
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
在我国,洪水时有发生,给国家以及人民群众生命财产安全造成了巨大的损失。为了防御洪水侵袭,减小洪灾造成的经济损失,对洪水的形成和运动规律进行研究是十分必要的。因此,及时准确
水资源短缺和水污染加剧已成为制约我国社会经济可持续发展的重要因素。解决这一危机的途径,一是开源节流,建立节水型社会;二是把水资源看作是宏观经济系统、水资源系统和生态环
  电脑游戏是目前青少年主要的娱乐方式,且逐渐成为教育、培训及能力训练的重要手段。有证据显示,电脑游戏能够增强玩家的认知功能,但大多呈现特异性。在青少年的认知能力中,注
会议
近年来,采用氢气作为内燃机替代燃料的研究引起国内外高度重视,大量的实验研究表明氢气是一种高效清洁的燃料。氢燃烧后生成水,唯一的污染物质是NOx,而且氢发动机具有良好的的动