【摘 要】
：
目的:该实验旨在建立一种体外分离培养、纯化扩增成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,从基础理论研究方面进一步探讨MSCs的生物学特性,并在一定条件下诱导定向分化成软骨
论文部分内容阅读
目的:该实验旨在建立一种体外分离培养、纯化扩增成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,从基础理论研究方面进一步探讨MSCs的生物学特性,并在一定条件下诱导定向分化成软骨细胞;采用组织工程学方法,应用MSCs在体内构建组织工程化软骨,为临床软骨损伤的修复提供理想方法.方法:1、用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化成年大鼠MSCs.2、取成年大鼠MSCs,进行倒置显微镜、透射电镜观察,免疫细胞化学法鉴定MSCs细胞膜抗原和细胞基质蛋白属性;体外加自行配制成骨诱导剂,倒置显微下进行观察,诱导7d、14d分别做碱性磷酸酶组织化学染色.3、体外加自行配制软骨诱导剂,倒置显微下进行观察,诱导7d、14d、21d分别做Ⅱ型胶原免疫组化、甲苯胺蓝染色,诱导21d透射电镜观察.4、以成年大鼠MSCs作为种子细胞,与纤维蛋白原形成凝胶植入大鼠关节软骨缺损模型的缺损部位,移植后2w、4w、6w分别取大鼠关节进行如下观察及实验:脏染色、甲苯胺蓝染色、BrdU免疫组化染色.结果:成年大鼠MSCs呈均一的成纤维细胞样,具有一般干细胞的超微结构特点.广泛表达Vimentin、CD<,29>、CD<,44>,不表达CD<,14>、CD<,34>,碱性磷酸酶弱阳性,Ⅱ型胶原免疫组化阴性;经成骨诱导后出现碱性磷酸酶强阳性,诱导21d局部出现矿化结节;经成软骨诱导后Ⅱ型胶原免疫组化阳性,出现异染性基质,诱导21dMSCs的超微结构似软骨细胞.植入大鼠关节软骨缺损2w,MSCs生长良好,细胞呈长梭形或多边形;植入4w,MSCs变成圆形或多边形,部分细胞形成陷窝;植入6w,多数MSCs变圆,形成陷窝,部分细胞形成同源细胞群,类似软骨组织.移植区可见BrdU阳性细胞.结论:1、密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化成年大鼠MSCs,用此种方法培养的细胞具有MSCs的一般生物学特性;2、MSCs体外诱导培养可分化成类软骨细胞;3、MSCs-纤维蛋白原凝胶复合体移植于同种异体的关节软骨机械损伤动物模型可以存活、生长,证明此法可以修复治疗关节软骨损伤.
其他文献
目的 研究HIF-1a、MMP-9和VEGF在宫颈鳞癌中的表达,并探讨三种标记物与宫颈鳞癌相关的临床病理因素间的关系.方法 采用免疫组化SABC法检测42例宫颈鳞癌(CSCC)、12例宫颈上皮
中国有色金属工业总公司南昌公司,对所属10个钨矿山的井下装运、提升和选厂索道设备的管理、使用、维修状况。进行了调查。通过调查摸清了存在的问题,提出了相应对策。
Chin
<正>2014年5月,成都建材院有限公司与沙特ALJOUF CEMENT COMPANY签署了利用该公司两条5 000 t/d水泥生产线协同处理废旧轮胎的工程总承包合同。该项目位于沙特阿拉伯王国北部
摘 要： 物理是一门非常抽象的学科，由于它的抽象性，就要求学生要有较强的逻辑思维能力。对于学生来说，抽象的东西理解起来相当困难，而物理情境就是把它变得直观、形象、容易理解。在高中物理教学中，应重视情境的创设和使用，不断激发学生的兴趣，更好地引导学生学习。 关键词： 高中物理教学 物理情境 创设方法 一、物理情境概论 （一）物理情境的定义 《中学物理情境与提出问题教学模式研究》对物理情境的定
目的:从成年SD大鼠股骨分离、培养并鉴定骨髓基质细胞(BMSCs),了解BMSCs的生物学特性和向雪旺氏细胞样细胞分化的规律.结论:1.5×10个BMSCs用50cells/cm的培养密度,传代2次约
本文主要介绍利用基于无线通信技术和串行通信技术,实现上课时故障机的远程报警,管理人员能及时应急,满足正常的教学活动。
This article mainly introduces the use of wir
摘 要： 随着新课程改革的不断深入，物理教学中的课堂提问这一方法得到大多数一线教师的肯定，也在教学实践中取得初步成果。但是目前教学中仍存在一些问题，本文对此进行了分析并就如何在高中物理教学中合理地应用课堂提问进行了研究。 关键词： 高中物理教学 课堂提问 实施方式 教育部教育振兴行动计划公布后，新的课程改革便如火如荼在全国基础教育中广泛地展开。这次举全国之力进行的课程改革是为更好地实施素质教育
数年前,面对在线经纪业的大潮,全球基金业执牛耳的富达岿然不动。然而,进入21世纪后,面对咄咄逼人的竞争对手,富达开始悄然换挡在抢占21世纪资产管理业制高点的赛跑中,富达(F
目的:结直肠癌是人类常见恶性肿瘤,传统预测结直肠癌预后的指标包括Dukes分期以及病理分级等,都不能准确反应结直肠癌的预后.结直肠神经内分泌癌(Neuroendocrine carcinoma N
目的:探讨高血粘度是否影响脑细胞内游离钙离子浓度、脑组织丙二醛及超氧化物歧化酶含量及其导致脑神经元损伤的机制.结论:1.高血粘度可导致脑细胞内钙超载及脑组织中自由基