咖伦宾对实验性2型糖尿病大鼠降糖作用及其机制研究

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目的:建立2型糖尿病大鼠模型,研究咖伦宾的降糖作用及其对葡萄糖转运体-4(GLUT-4)蛋白表达量和胰岛素受体结合能力的影响,探讨咖伦宾可能的降糖作用机制。方法:(1)高糖高脂饲料喂养3个月联合小剂量链脲佐菌素(STZ)30mg/kg腹腔注射建立实验性2型糖尿病大鼠模型,动物分为5组:正常对照组,模型对照组,咖伦宾低剂量组(25mg/kg),咖伦宾高剂量组(50mg/kg)和阳性对照组(二甲双胍,200mg/kg)。灌胃给药4W,1次/天,以空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(ISI)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、大鼠体重、葡萄糖耐量作为检测指标观察药物的降糖作用。(2)给药4周后,各组大鼠断头处死,分别取部分右下肢股四头肌、肝脏提取骨骼肌细胞膜和肝细胞膜总蛋白。采用Western Blotting法检测骨骼肌葡萄糖转运体(GLUT)-4蛋白量的表达,放射性配基受体结合法检测肝胰岛素受体的结合能力。结果:(1)经高脂饲料喂养后,大鼠空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、自由脂肪酸(FFA)显著高于正常对照组(p<0.05),胰岛素抵抗指数显著降低(p<0.05)。给药后,各给药组动物体重呈下降趋势,组间比较无统计学差异(p>0.05)。整个实验过程中,模型对照组血糖稳定,至给药14天时,咖伦宾低剂量组、高剂量组、二甲双胍组血糖值分别较模型对照组下降15.04%、19.65%、20.18%(p<0.05);至28天给药结束,各组血糖值分别下降24.97%、30.85%、42.79%,和模型对照组比较,咖伦宾低剂量组差异有显著意义(p<0.05),咖伦宾高剂量组和二甲双胍组差异有极显著意义(p<0.01)。与模型对照组相比,药物治疗后血中胰岛素水平无明显改变(p>0.05),而模型对照组胰岛素抵抗指数显著低于正常组(p<0.01),给药后胰岛素抵抗指数显著增高(p<0.05)。与模型对照组相比,咖伦宾低剂量、咖伦宾高剂量和二甲双胍组糖耐量明显改善(p<0.05),各组血糖水平在0.5h、1h、2h均有显著降低(p<0.05),血糖值均在灌胃葡萄糖后0.5h达到高峰。给药组动物TC、TG均显著降低,与模型对照组比较差异有极显著意义(p<0.01),咖伦宾低、高剂量组和二甲双胍组游离脂肪酸降低,与模型对照组相比,差异有统计学意义(p<0.01或p<0.05)。(2)模型对照组大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达量明显低于正常对照组(p<0.01),给药后咖伦宾低、高剂量组和二甲双胍组GLUT4蛋白表达量显著增加(p<0.01)。(3)与正常对照组比较,2型糖尿病模型组大鼠肝细胞膜胰岛素受体解离常数KD明显升高(p<0.01),受体最大结合容量Bmax增加(p<0.05)。给药后各组大鼠肝细胞膜胰岛素受体解离常数KD显著降低(p<0.01),Bmax减少,与模型对照组比较,咖伦宾低、高剂量组和二甲双胍组差异有显著意义(p<0.05或p<0.01)。结论:(1)咖伦宾对实验性2型糖尿病大鼠具有降糖作用;(2)咖伦宾上调糖尿病大鼠骨骼肌细胞膜GLUT4蛋白的表达量;(3)咖伦宾提高糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体的结合能力。
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