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背景/目的： 低氧微环境和低氧诱导因子（HIF-1α）在许多肿瘤中发挥重要的作用，而绒癌相比于其他肿瘤更能适应低氧微环境，因此是研究低氧适应性的重要模型。斑点状的POZ蛋白（SPOP），是一个新的肿瘤相关蛋白，先前报道在不同的肿瘤中扮演不同的角色，但在绒癌中的作用是未知的。本篇文章主要针对绒癌中SPOP的表达情况及作用，低氧条件下SPOP和HIF-1α的关系以及绒癌的发生机制做初步的探讨。 方法： （1）用免疫组化法检测SPOP蛋白在绒癌组织和正常绒毛中的表达。用qRT-PCR和western blotting法检测SPOP在HTR8-SVneo、JAR和JEG3三种滋养层细胞中的表达 （2）分别构建过表达和干扰SPOP基因的慢病毒载体，转入到绒癌细胞系JAR中。用qRT-PCR和western blotting法检测转染效率。 （3）用Transwell小室法和划痕实验检测转染了慢病毒后JAR细胞侵袭和迁移能力。CCK8法检测SPOP对细胞增殖活力的影响。裸鼠成瘤实验检测SPOP对JAR细胞体内生长增殖能力的影响。 （4）采用流式细胞术检测SPOP对细胞凋亡和周期的影响。 （5）用western blotting法检测了PTEN/PI3K/AKT信号通路相关蛋白以及EMT相关蛋白的表达，主要包括PTEN、PI3K、p-AKT、p-GSK3β、E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白的表达水平。 （6）利用qRT-PCR和western blotting法检测经化学试剂Cocl2低氧处理后，SPOP蛋白的表达情况；用 si-RNA构建干扰 HIF-1α的模型，western blotting法检测HIF-1α和SPOP的表达。 （7）用western blotting法检测低氧环境下EMT相关蛋白的表达；采用细胞免疫化学法和核质蛋白分离实验检测常氧和低氧条件下SPOP在细胞中的定位。 （8）用western blotting法和Transwell小室法检测SPOP是否参与介导低氧诱导的EMT。 （9）用微阵列基因芯片技术检测过表达SPOP后差异基因的表达，进一步验证 SPOP调节绒癌发生的可能机制，再通过生物信息学分析寻找可能与SPOP相互作用的潜在底物。 结果： （1）与正常的绒毛组织和滋养层细胞HTR8相比，SPOP在绒癌组织和绒癌细胞系JAR和JEG3中均表达下调。 （2）JAR细胞转染慢病毒过表达SPOP后，与空载对照组相比，细胞的侵袭迁移和增殖活力均明显减弱，裸鼠成瘤后的体积也明显减小。相反，干扰组的细胞相较于对照组侵袭迁移和增殖活力均明显增强。 （3）流式细胞术检测细胞凋亡和周期。凋亡结果显示，在过表达SPOP组可增加细胞的凋亡数，而干扰组对细胞凋亡无明显影响。周期结果显示，SPOP水平的变化会影响JAR细胞周期的各个期（包括G1、S、和G2/M）的分布。 （4）SPOP可调节PTEN/PI3K/AKT信号通路和EMT相关蛋白的表达。结果显示，过表达SPOP后PTEN和E-cadherin表达上调，PI3K、p-AKT、p-GSK3β、N-cadherin和vimentin表达下调；敲低SPOP后，结果与之相反。 （5）经低氧处理后的JAR和JEG3细胞SPOP和HIF-1α表达增加，并且低氧明显影响SPOP和HIF-1α的蛋白水平，对mRNA的水平影响不大。同时用siRNA方法干扰HIF-1α可相应降低SPOP的表达。 （6）细胞免疫化学实验和核质蛋白分离实验发现SPOP在正常的滋养层细胞HTR8中定位在胞核，而在绒癌细胞系JAR和JEG3中大多数定位于胞质。之后对绒癌细胞进行低氧处理，发现SPOP在胞核胞质的表达均增多，但更多的聚集到细胞核。 （7）低氧处理可以诱导细胞发生 EMT转化，同时进一步实验证明SPOP参与了低氧诱导的EMT转化。 （8）微阵列芯片鉴定了971个差异基因，31个基因表达上调，940个基因表达下调。对差异基因富集分析后证实了SPOP确实参与了绒癌生长增殖的调控。 结论： 低氧微环境下SPOP通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路和EMT相关蛋白的表达从而调节绒癌侵袭生长，可作为治疗绒癌的潜在的和新的靶点。然而，还仍然有许多问题需要探索。