【摘 要】
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该研究从植物基因整体水平上去探讨耐盐相关基因,对揭示植物耐盐的分子机理是十分必要的.主要结果:1.建成了盐胁迫下库拉索芦荟消减文库.看家基因EFlα鉴定表明,文库具有较高
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该研究从植物基因整体水平上去探讨耐盐相关基因,对揭示植物耐盐的分子机理是十分必要的.主要结果:1.建成了盐胁迫下库拉索芦荟消减文库.看家基因EFlα鉴定表明,文库具有较高的消减效率.随机挑出13个克隆进行限制内切酶分析,结果有10个质粒舍有300-600bp的插入片段.经差示筛选,我们鉴定出10个在盐处理库拉索芦荟中特异表达的候选克隆.对其中的3个进行单向测序.其中一个序列在GenBank中登录,获得的序列号为No.AYl79511.2.盐处理12个小时后NADP-苹果酸酶mRNA诱导增加,且两种芦荟中的表达量都在48小时后达到高峰.但是其表达水平是不相同的,Aloe vera L.显然比Aloe saponarea Haw.高出许多.如此相类似,NADP-苹果酸酶活性在盐处理12小时后开始诱导增加,活性稳步增加至72小时.但是Aloe vera L.中NADP-苹果酸酶活性较Aloe saponarea Haw.中NADP-苹果酸酶活性高的多.这些表明,盐胁迫可以诱导这两种芦荟中的NADP-苹果酸酶基因的表达和NADP-苹果酸酶蛋白的积累,但是诱导的强度与芦荟品种的耐盐程度有关.3.NADP-苹果酸酶基因AvME的表达受盐、干旱和外源ABA的诱导表达,但寒冷处理似乎对其不起作用.其中,AvME mRNA的盐诱导强度最高.盐处理后12个小时,AvME mRNA有明显的诱导表达,一直增加到72小时,接着有所下降;干旱处理6个小时后AvME mRNA也被诱导,一直增加到12小时后下降;外源ABA处理后,AvME mRNA的积累较盐、干旱胁迫早.3个小时后,AvME mRNA就快速积累,持续到12小时.4.Western Blot分析表明盐处理48小时后NADP-苹果酸酶合成明显增强,且其强度随着处理时间的延长而提高.这一结果与前面的AvME转录水平的变化相一致.
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