多发性骨髓瘤DAZAP2基因启动子结构和功能研究

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为了寻找多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)新的相关基因,本所的石奕武博士等利用cDNA芯片分析了患者与正常人骨髓单个核细胞的基因表达,显示DAZAP2(deleted in azoospermia aSSOCiated protein 2)基因表达在删患者中明显下调。用半定量RT-PCR和Western blotting检测MM患者和正常对照骨髓单个核细胞DAZAP2基因的表达,得到与之前一致的结果。这些结果表明DAZAP2基因可能在删的发生、发展中具有重要的生物学意义。 为了进一步明确DAZAP2基因在多发性骨髓瘤疾病发生中的作用,我们利用生物信息学方法找到了DAZAP2基因上游启动子区域,并进行了分析,发现该区域存在3个CpG岛。然后将该启动子区域的一段基因序列克隆至荧光素酶报告基因载体,并且将通过Sss I甲基化酶处理后的片段插入到荧光素酶报告基因载体,瞬时转染COS-7细胞,并检测荧光素酶的表达活性,显示该启动子区域具有很强的活性,且该片段经过甲基化酶处理后,活性受到明显抑制,表明DAZAP2基因启动子的甲基化与DAZAP2基因的表达下调有关。进而我们采用分段克隆的方法,将该基因启动子的不同区域克隆至荧光素酶报告基因载体,瞬时转染COS-7细胞,通过检测,找到了该启动子的核心区域。
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