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[目的]前期工作发现苦瓜蛋白M28可上调THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达而减少细胞内的脂质蓄积,但其机制不清楚。本研究拟从转录后水平分析其作用机制。[方法]首先用mi R芯片技术分析经苦瓜蛋白干预后,50mg/ml ox LDL处理48h的THP-1源性泡沫细胞的mi Rs谱中下调1.5倍的mi Rs,并与genecards调控ABCA1基因表达的mi Rs比较,找到2者共同mi Rs,然后用生物信息学手段预测此mi Rs与ABCA1之间的靶基因关系,并以荧光素酶报告基因系统加以验证。q RT-PCR和western blot分别检测ABCA1 m RNA和蛋白表达水平,q RT-PCR检测mi R-23-3p表达水平,液体闪烁计数法测定胆固醇流出,油红O染色法测定胞内脂质蓄积,最后再用生物信息学分析mi R-23b-3p表达调控的转录因子。统计学分析采用均数±标准差(x±SD)表示,用Graphpad Prism5.0.1对数据进行分析和作图,选取95%可信区间,P<0.05为差异有显著性意义。[结果]mi R芯片分析发现69个mi Rs表达显著下调,genecards上显示113个mi Rs以ABCA1为靶基因,2者的交集是hsa-mi R-93、hsa-mi R-642b、hsa-mi R-23b-3p、hsa-mi R-130a、hsa-mi R-513a-5p、hsa-mi R-26a和hsa-mi R-33a 7个mi Rs,这7个mi Rs以hsa-mi R-23b-3p在苦瓜蛋白MD28干预后下降幅度最大,达到12倍,其余大多不超过2倍,因此,以hsa-mi R-23b-3p作为深入分析苦瓜蛋白MD28下调ABCA1表达的mi R。人ABCA1的3’-UTR有3个mi R-23-3p的结合位点,其中255-261为保守位点,其与ABCA1 3’UTR结合的自由能为-25.3kcal/mol。靶基因验证实验证实ABCA1是hsa-mi R-23b-3p的靶基因。苦瓜蛋白MD28剂量(0mg/ml、0.4 mg/ml、1.2 mg/ml、3.6 mg/ml、5 mg/ml)和时间(0h、6h、12h、24h、48h)依赖性地上调ABCA1 m RNA及蛋白的表达水平,以1.2 mg/ml作用12h最为显著。使用hsa-mi R-23b-3p的抑制剂可减弱苦瓜蛋白MD28对ABCA1的上调作用,并减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和增加胞内的脂质蓄积。q RT-PCR分析结果表明苦瓜蛋白MD28能上调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞hsa-mi R-23b-3p的表达水平,生物信息学分析表明,MYC、TGFβ、SPⅠ1、Run X2、EGR1、CREB1、ESR2、FXR在hsa-mi R-23b-3p基因的启动子上有结合位点。[结论]苦瓜蛋白MD28剂量和时间依赖性地上调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 m RNA及蛋白的表达水平,增强胆固醇流出,减少脂质蓄积,且其均与下调hsa-mi R-23b-3p有关。