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猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV)引起的以妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的传染病，并已成为危害全球养猪业最严重的传染病之一。沙门氏菌作为一种细胞内侵袭性寄生菌，能有效的呈递外源抗原，能同时激发机体产生抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫应答。本研究以携带PRRSV ORF5基因的重组减毒猪霍乱沙门氏菌为研究对象，检测了其生物学特性和免疫学特性，为PRRS新型基因工程疫苗的研究和减毒猪霍乱沙门氏菌携带和表达外源基因的可行性提供了新的思路。（1）实现了PRRSV ORF5的原核表达将PRRSV ORF5基因的N端的31个氨基酸的信号肽编码序列截去，构建了原核表达载体pET28a-dORF5并实现了高效表达，经SDS-PAGE和Western-blot检测表明，表达的PRRSV GP5重组蛋白具有良好的反应原性。进而将表达的GP5蛋白经镍柱纯化并复性后，得到了纯化和复性的GP5蛋白，为进一步研究GP5蛋白的生物学功能奠定了良好的基础。（2）重组PRRSV ORF5减毒猪霍乱沙门氏菌的生物学特性研究对重组菌的表型性状、生长特性、稳定性以及安全性等生物学特性进行检测，并对其表达的GP5蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示，该重组菌株恢复了在DAP阴性环境中生存的能力；同时不能利用麦芽糖、果糖及蔗糖等碳源，但仍能够利用葡萄糖，其生长速度明显低于强毒株C78-1，而与crp asdC78-1相比没有明显变化；在体外连续传代培养能够稳定遗传578bp dORF5基因片段。Western-blot分析证实重组菌表达的GP5蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合；通过口服感染的途径，测得亲本株C78-1的毒力是重组菌crp asdC78-1(pYA-dORF5)的492倍，而疫苗株C500的毒力是重组菌的1.31倍。（3）重组PRRSV ORF5减毒猪霍乱沙门氏菌免疫学特性初步研究将重组菌接种小鼠，对其在小鼠体内的分布情况进行了检测。同时，分别应用ELISA方法检测小鼠不同时期血清中抗PRRS GP5抗体、沙门氏菌抗体和肠液中SIgA抗体的产生情况以及MTT法检测淋巴细胞分化情况，以了解重组菌的免疫学特性。结果显示，重组菌能够在小鼠体内稳定存活，具有良好的侵袭力。血清抗体IgG检测结果显示，在二次免疫后第1周，抗GP5抗体达到高峰，OD值达到0.788，此时空白菌对照组和PBS对照组的OD值仅为0.022和0.0218；而对于沙门氏菌IgG抗体来说，重组菌株与疫苗株C500的免疫力相当。二免后4周小鼠肠粘膜液中分泌性SIgA抗体的量显著高于两个对照组，分别为10.58、0.55和2.73；淋巴细胞转化实验表明该重组能够刺激小鼠产生较强的细胞免疫应答反应，说明该重组菌能诱导小鼠产生较强的抗体水平和激发多种免疫应答方式。