【摘 要】
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目的:观察miR-21对人脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响,探讨miR-21的生物学功能,并对其作用机理做更深入的研究,寻找诊断、治疗胶质瘤的新方法和途径。方法:体外化学合成anti-mi
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目的:观察miR-21对人脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响,探讨miR-21的生物学功能,并对其作用机理做更深入的研究,寻找诊断、治疗胶质瘤的新方法和途径。方法:体外化学合成anti-miR-21,采用脂质体转染的方法导入胶质瘤U87细胞系中,应用cck-8法及流式细胞术检测其对U87细胞增殖及凋亡的影响;应用实时荧光定量PCR检测转染后PDCD4和PTEN的mRNA水平;应用Western blot检测PDCD4和PTEN基因蛋白表达。结果:抑制miR-21后对U87细胞的生长具有抑制作用,促进了细胞凋亡;转染anti-miR-21后PDCD4和PTEN mRNA和对照组相比无明显变化;miR-21基因抑制后PDCD4和PTEN基因的蛋白表达增高。结论:应用RNA干扰技术在转染anti-miR-21后出现肿瘤细胞的生长阻滞,诱导凋亡,表明miR-21起到了一个类似癌基因的作用,使miR-21基因沉默后,PDCD4和PTEN的mRNA水平变化不明显,而其蛋白表达水平提高,表明miR-21基因可能通过转录后水平作用于两个靶基因,而目前胶质瘤的基因治疗多是针对某一基因的治疗,多基因治疗在探索中,miR-21基因敲除后,可使两个靶基因的蛋白翻译受到调节,起到了多基因治疗的效果,miR-21作为胶质瘤基因治疗的新靶点提供了新思路。
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