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目的:建立荧光原位杂交技术的试验平台,用FISH技术检测宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的患者宫颈脱落细胞染色体中hTERC基因的扩增和非整倍体异常情况,分析hTERC基因扩增与宫颈病变的关系,协助临床筛查宫颈癌前病变及宫颈癌,预测宫颈病变的进展,探索FISH检测宫颈病变的诊断标准,探讨FISH技术作为早期预防宫颈癌的诊断方法的价值。
方法:收集20例正常妇女及82例宫颈病变患者的宫颈脱落细胞,将宫颈病变患者列为实验组,其中CIN1组11例,CIN2组26例、CIN3组22例、宫颈癌组23例,20例正常妇女列为对照组；用荧光原位杂交方法(FISH)分别标记3号染色体着丝粒及3q26的hTERC基因,从而检测hTERC基因扩增情况及3号染色体的非整倍体异常情况。最后比较液基细胞学结果、组织病理学结果与hTERC基因的异常扩增情况之间的关系。
结果:根据20例病理学检测结果为正常的患者的hTERC基因扩增情况建立的阈值为12.75％,即所有病例检测为hTERC基因扩增率>12.75％者被认为是扩增阳性病例。(1)将实验组及对照组的患者,按TCT检查结果分为炎症、不典型鳞状上皮细胞.未明确诊断意义(ASCUS)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)和浸润性子宫颈鳞状细胞癌(SCC),hTERC基因异常扩增率分别为20％、20％、58.97％、94.7％(2)按病理组分为CINl、CIN2、CIN3及宫颈癌患者,其hTERC扩增阳性率分别为9.1％、57.7％、100％、95.7％。CIN3及宫颈癌的hTERC基因的扩增率明显高于其它组。(3)hTERC预测宫颈高度病变(CIN2/3及宫颈癌)的敏感度、特异度分别为83.10％、96.78％。
讨论:随着细胞学及组织学病变程度的增加,hTERC的扩增数逐渐增高。FISH技术具有临床应用可行性。FISH技术可作为细胞学筛查的有效辅助手段,协助临床提高宫颈病变的筛查率。对于病理学难以区分的CIN1、CIN2,hTERC检测可以辅助鉴别。并且FISH技术可以做为监测宫颈病变的进展情况的一个指标,对于出现基因明显扩增者,应该密切随访。