枯草芽孢杆菌KC-5的分离鉴定及发酵工艺优化

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangbao_2002
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土壤中含有丰富的微生物资源,枯草芽孢杆菌是其中具有重要研究和应用价值的微生物类群之一。由于具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用,该菌在生物防治领域具有巨大的应用开发潜力。本研究从青岛胶南市琅琊台油菜地根际采集土样,采用平板划线和平板对峙方法筛选土样中的微生物,获得一株对尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、层出镰刀菌、腐皮镰刀菌等多种病原真菌均具有抑制作用的拮抗菌株。经形态学、生理生化以及16S rRNA序列系统发育等分析,将分离到的拮抗菌株鉴定为枯草芽孢杆菌,并命名为KC-5。为了提高该菌的发酵效率,本研究对其发酵培养基和摇瓶发酵条件进行了优化。确定了最佳发酵培养基组分为玉米淀粉5 g/L、豆饼粉12.5 g/L、NaCl 12.18 g/L、KH2PO40.5 g/L、CaCO31.25 g/L、MgSO40.2 g/L和MnS04 0.25 g/L;最佳发酵条件为温度为30℃,初始pH值为7.0,接种量为2%,摇床转速为200 rpm。在最佳摇瓶发酵条件下,菌体数量达到47 × 108 cfu/mL。为了使其能够在生产中应用,又对其进行了发酵罐扩大培养,得到最大芽孢数为30.3 × 108 cfu/mL,为微生物菌剂的开发奠定了基础。为了验证枯草芽孢杆菌KC-5菌株在田间应用的生防潜力,本研究以黄瓜幼苗作为代表植物,以尖孢镰刀菌作为生防对象,对其进行了防效测定,结果表明,枯草芽孢杆菌KC-5对黄瓜茎枯病具有一定的生防潜力。
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