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目的:随着肿瘤治疗研究的深入,以PD-1抑制剂为代表的免疫治疗已成为重要的肿瘤治疗手段。阻断PD-1/PD-L1可拮抗肿瘤微环境的抑制作用,使耗竭细胞毒性T细胞重新活化,增强机体内源性的抗肿瘤免疫效应;近年来PD-1抑制剂在临床应用中取得了出众的治疗效果,但也存在反应率偏低和原发/继发性抵抗的问题。与此同时,前期研究表明低剂量地西他滨能够直接活化与扩增分泌IFN-γ的Th1细胞和细胞毒性T淋巴细胞,低剂量地西他滨疗法在肿瘤治疗中同样表现出强大的潜力,然而低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用会不会展现更强的抗肿瘤活性仍不清楚。本研究旨在探究低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用是否具有更强的抗肿瘤活性,并初步探究其相关机制。方法:我们通过前期PD-1抑制剂反应性实验筛选,使用MC38荷瘤小鼠模型作为低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用抗肿瘤效应的研究对象。设置对照组、低剂量地西他滨治疗组、PD-1抑制剂治疗组以及低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合治疗组。给药治疗之后定期记录各组小鼠肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线与小鼠生存曲线。使用小鼠CD4/8抗体拮抗各组小鼠体内CD4/8+T淋巴细胞之后给药治疗,定期记录各组小鼠肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线;采用小鼠CD4/8磁珠分选肿瘤浸润CD4/8+T淋巴细胞并分析其数量差异,使用流式细胞术分析各组小鼠肿瘤T细胞亚群的比例差异,探究抗肿瘤相关免疫细胞类型的改变。结果:与对照组相比,低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联用能够有效抑制肿瘤生长,同时延长小鼠生存期;流式分析表明:低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用能够促进肿瘤浸润T淋巴细胞活化与增殖,协同促进Th1与细胞毒性T淋巴细胞的功能,同时抑制Treg的活性;肿瘤浸润CD4/8+T淋巴细胞绝对计数的结果表明:低剂量地西他滨主要促进CD4+T淋巴细胞的增殖,而PD-1抑制剂主要促进CD8+T淋巴细胞的增殖,同时低剂量地西他滨与PD-1联用能够显著促进CD4/8+T淋巴细胞的增殖;CD4/8+T淋巴细胞体内敲除实验表明:在体内拮抗CD4/8+T淋巴细胞后,各给药组的肿瘤抑制作用均被削弱,CD4+T细胞与CD8+T细胞在低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合所增强的抗肿瘤免疫反应中均发挥重要作用;应用MC38结肠癌细胞系的再荷瘤实验表明:低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用能够持续增强抗肿瘤免疫反应,且该抗肿瘤免疫反应具有记忆性。结论:低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联用能够有效抑制肿瘤生长,促进肿瘤浸润T淋巴细胞活化与增殖,协同促进Th1与细胞毒性T淋巴细胞的功能,同时抑制Treg的活性;该联合作用具有持续性与记忆性,且与CD4/8+T淋巴细胞均密切相关。在临床治疗中,低剂量地西他滨与PD-1抑制剂联合应用可能是治疗肿瘤的有效疗法。