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随着腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)的开展,医源性胆管损伤的发生率明显增加。胆肠吻合术作为临床上胆管损伤常用的治疗方法,由于放弃奥狄氏括约肌的功能,近远期有并发逆行性胆道感染、胆管炎、甚至胆管癌的风险。随着临床上对奥狄氏括约肌功能的重视,有必要寻找合适的胆管修复材料保留奥狄氏括约肌的功能。可降解修复材料具有无免疫原性、暂时性支持作用、降解产物对身体无害等优点,有希望成为可供选择的胆管修复材料。胶原蛋白作为细胞外最重要的纤维蛋白,是可降解材料中的一种理想的细胞生长支架材料。然而,研究不同材料的修复,首先需要寻找到一种适当的修复模型,目前关于胆管修复模型的报道中,主要存在两种不同的建模方式:一种是直接原位缝合胆管修复材料,另一种是置入胆管内引流后原位缝合胆管修复材料。这两种建模方式各有优缺点,对于这两种胆管修复模型的比较方面,目前尚无定论。本研究通过体外胶原材料理化性质的初步了解及体内两种胆管修复模型的比较,为进一步深入研究胶原材料的胆管修复筛选一种稳定的模型。全文分为两个部分:
第一部分可降解材料理化性质初探,
目的:初步了解胶原材料在体外的理化性质及其变化。
方法:1.利用扫描电镜了解胶原材料孔隙率及孔径情况。2.取4片3.0cm×0.5cm×1.0mm的矩形胶原膜薄片,直接测量拉伸强度。3.取4片3.0cm×0.5cm×1.0mm的矩形胶原膜薄片,放入盛有新鲜胆汁的培养皿内浸泡,并放入37℃恒温箱内保存,浸泡30d,期间观察材料形态学变化。
结果:胶原材料具备合适的孔隙率及孔径,未经胆汁浸泡过的胶原材料,其拉伸强度均能达到16N以上,经胆汁浸泡过的胶原材料在3周失去原有形态。
结论:胶原材料符合体内胆管修复研究的要求。
第二部分两种胆管修复模型的比较
目的:比较两种胆管修复模型的差别,筛选最佳实验模型。
方法:10-20kg中国三元杂交猪8只,分A、B两组,胆总管前壁纵径切开2cm,予可降解材料补片原位缝合,术中分别采用置入胆管内引流(A组,n=4)和不置入胆管内引流(B组,n=4)的方法。比较术中手术方式的差异,评估术后2个月内两组动物的生活状况,监测术前及术后第1,2,3天,第1,2,3,4,6,8周肝功能、C反应蛋白(CRP)。
结果:A组术后全部存活,最长至术后2个月,精神、食欲佳,体重增加,活动状况良好,复查肝功能与术前无差异,CRP基本正常。B组4只猪术后均出现渐进性食欲下降,腹泻,体重减低,2只分别于术后第3天、第5天死于胆漏,1只于术后第1周死于胆道梗阻,1只于术后第2周出现CRP升高,第4周死于胆漏。
结论:使用胆管内引流的胆管修复模型,手术成功率高、并发症少,实验动物术后生存稳定,可供长期观察研究,是相对简单、稳定的建模方式,可以进一步用于胶原材料胆管修复机制的研究。