黄栌枯萎病病原菌及致病机理研究

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黄栌作为香山红叶景观的主体,为北京市的生态环境建设发挥着巨大的作用。但是近年来,由于缺乏有效的控制措施致使黄栌枯萎病严重发生,不仅破坏了红叶景观,而且造成黄栌的大量死亡,已成为严重影响北京市景观建设的重要生物灾害。针对黄栌枯萎病难于控制的特点,本文系统的研究了黄栌枯萎病病原菌致病性测定、生物学特性、发病与健康黄栌根系真菌群落的分析、根系优势菌群接种后对黄栌干部电指标、组织病理的变化及病原菌粗毒素生物活性的分析,为进一步揭示黄栌枯萎病病害发生机制和无公害治理提供基础资料。主要结果如下:1、通过病原菌形态和分子鉴定,进一步明确黄栌枯萎病病原菌为大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)。V.dahliae菌落大致分为五种不同形态,菌落适宜在PDA培养基上生长,分生孢子致死温度大约为45℃,最适宜萌发温度在25℃~30℃。对碳的利用以葡萄糖、麦芽糖、淀粉为最佳;对氮的利用以硝酸钾为最佳,铵态氮对菌落的生长繁殖有抑制作用。2、对黄栌枯萎病根的真菌种类、数量及季节动态作了分析,结果表明:不同季节黄栌枯萎病根真菌群落组成不同,V. dahliae、Fusarium spp.、Oidiodendron sp.、Cylindrosporium sp.、Gliocladium sp..等为黄栌枯萎病根的优势菌种。但是不同季节出现频率不同。V. dahliae主要出现在5~6月份,分离频率达到100%。3、单独接种Fusarium spp.和Cylindrosporium sp.不同菌株均未发病,3个Verticillium dahliae菌株的发病率分别达到60%、70%和90%;而V. dahliae和不同Fusarium spp.混合接种发病率为100%;重新分离V. dahliae的菌株占黄栌根、茎、叶等不同部位真菌菌株总数的61.7%;其中叶部真菌菌株的96.97%为V. dahliae。接种V.dahliae后,随着侵染进程的发展,树木干部电容和单位电容呈减小趋势,而树木干部电阻呈增大趋势;同时发现不论健康植株还是发病植株,树体电容值随两极间距的加大而减小,呈显著的负相关关系,而树体电阻随两极间距的加大而增大。4、来源于不同地区黄栌枯萎病病根的V.dahliae菌株对1年生黄栌苗的致病性没有显著差异。随着接种天数的增加,在根系导管中能观察到菌丝侵染、红褐色物质、胶状物等不同的填充物,但是大多数填充物不是在整个区域都有存在,只是在根横断面的某一区域出现。随着接种天数变化,被菌丝、胶状物等不同内含物侵染的导管则增多,并且在次生韧皮部中树脂道中分泌聚集物质也随之增加。5、V.dahliae粗毒素对胚根、不同离体嫩枝、离体叶片、活体幼苗都有一定的毒害作用,高温灭菌的粗毒素对离体黄栌嫩枝的致萎作用不明显,毒害作用不强。6、采用常规分离法从不同地区健康黄栌的根系中共分离得到33株内生真菌,优势类群主要有无孢菌群、腐质霉属、青霉属等,且不同地区黄栌根系内生真菌种类和数量有一定差异。通过内生真菌对V.dahliae的拮抗试验发现,团炭角菌、黑乌霉属、假丝酵母属的菌株具有较好的抑制作用,而其它内生真菌对V.dahliae均有不同程度的抑制作用。
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