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在过去的五十年中,商业化肉鸡饲养量快速增长,饲料转化效率以及生长速率迅速提高,肉鸡出栏时体重已提高了四倍。股骨头分离(Femoralheadseparation,FHS)是一种存在于快速生长肉鸡中的常见腿病,以股骨近端的生长板从关节软骨上分离为特征性病变。在股骨头分离早期,病鸡并不出现临床症状,但可逐渐出现骨骺的损伤,感染,以及股骨头坏死(femoral head necrosis,FHN)。股骨头坏死常导致患鸡跛行而不能正常饮水和采食,严重影响肉鸡健康。骨骼生物学指标的变化常被用来作为骨骼疾病的特征性评判指标。本试验通过对股骨和胫骨进行一系列物理指标的检测,来探讨股骨头坏死是否对支撑全身重量的腿部骨骼的物理性状有明显的影响。股骨头坏死发生机理非常复杂,目前尚无定论,由于干骺端软骨细胞的凋亡会影响股骨头血液灌流,从而导致股骨头因缺乏营养供应而坏死,因此本试验从细胞凋亡相关信号通路相关的研究出发尝试探讨该病可能的发生机理。1.股骨头坏死肉鸡的模型建立、骨生物学特征研究本研究采用糖皮质激素注射,来研究糖皮质激素建立股骨头坏死模型的效果及患病肉鸡骨生物学、血液生化、骨内生物羟基磷灰石的变化情况。1日龄的Ross 308白羽肉鸡100羽,随机分成试验组及对照组,每组50羽,组内设5个重复。试验组胸肌注射甲泼尼龙琥珀酸钠(20 mg · kg-1 · d-1),连续注射7 d,对照组注射等量生理盐水,分别于21日龄及42日龄检测发病情况,对采食量、体重进行记录。采集血清进行血钙、血磷、甘油三酯、总胆固醇及碱性磷酸酶等生化指标的测定,剖检并采集肉鸡股骨及胫骨进行骨生物学指标的检测及拉曼光谱分析。试验结果显示,糖皮质激素类药物处理后,股骨头坏死肉鸡发病率可达到36.37%,处理组采食量及体重明显降低,血钙、血磷、甘油三酯、总胆固醇及碱性磷酸酶都有升高趋势,骨密度、骨强度、骨指数等骨骼生物学指标显著下降,说明糖皮质激素可诱导患病肉鸡骨骼生物学特征发生明显改变,导致肉鸡股骨头坏死的发生。2.ASK-JNK信号通路在肉鸡股骨头坏死发生中的调控作用研究软骨细胞是股骨头生长板和关节软骨内主要的细胞成分。由于软骨内并无血管和神经的支配,软骨细胞的代谢只能通过渗透作用来实现,因此,软骨细胞对营养物质和氧气的缺乏、氧化物聚集和机械性压力等应激因素非常敏感。本试验的目的在于研究ASK-JNK信号在股骨头坏死肉鸡软骨细胞凋亡中的调控机理。本试验分离采集了股骨头坏死肉鸡与正常肉鸡生长板及软骨样本,荧光定量PCR检测Col-2、Col-10、Bcl-2、Caspases-3、Caspases-9、ASK-1和JNK-1等各基因表达水平,免疫组化分析了 JNK蛋白表达情况。结果显示,股骨头坏死肉鸡生长板内Col-2、Col-10、Bcl-2的mRNA 表达量明显降低(P<0.01),Caspases-3、Caspases-9、ASK-1 和 JNK-1 的 mRNA表达量显著增高(P<0.01)。ASK-1的表达上升,激活caspase级联反应及JNK信号通路,导致软骨细胞的凋亡。