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芦笋(Asparagus officinalis Linn.),学名石刁柏,为百合科天门冬属多年生草本植物。成分分析表明,芦笋中含有游离氨基酸、维生素、微量元素硒等多种营养成分,以及甾体皂苷、多糖、黄酮类等药用成分,具有极高的药用价值。现代药理学研究表明,芦笋提取物对多种癌细胞均有抑制作用,具有降血脂、提高人体免疫功能、抗衰老等功能,其中甾体皂苷为重要的物质基础。随着我国芦笋种植面积逐年扩大,加工过程中产生的大量芦笋茎皮边角料被作为垃圾处理,既污染了环境,又造成了资源的浪费。为了减少浪费,提高芦笋综合开发利用价值,针对芦笋中的皂苷类成分,本文开展了以下几方面的研究: 对皂苷类物质的紫外测定方法进行了全面考察,从中选出了茴香醛-硫酸法作为芦笋总皂苷测定方法,并利用正交试验设计考察了最佳显色条件。实验结果表明,茴香醛-硫酸法的最佳显色条件为样品挥干,加入1%茴香醛无水乙醇液0.2ml,100℃水浴30min,取出,冷却,于429nm下进行测定。结果显示菝葜皂苷元在10~100μ g范围内呈良好的线性关系,r=0.9999(n=7),平均回收率为100.67%,RSD为1.25%。测定结果较香草醛-高氯酸法准确,且快速、简便,测定结果可靠。 利用茴香醛-硫酸法对不同种类、不同部位的芦笋样品进行了含量测定。结果表明,白笋茎中总皂苷含量远远高于青笋;脱脂前后芦笋老茎的叶、小枝中皂苷含量均大于茎,说明皂苷主要存在于芦笋的小枝和叶中:白笋茎和笋皮的测定结果表明,白笋茎和笋皮中总皂苷含量均较高。此测定结果说明芦笋茎皮边角料有很大的利用价值。 全面考察了芦笋总皂苷提取工艺。采用单因素和正交实验相结合,考察了各因素对提取工艺的影响,得到最佳提取工艺为85℃下,加入35(20+15)倍量70%乙醇,回流提取两次,每次0.5h。本工艺芦笋总皂苷提取率达41.09mg/g,提取率较高。 研究了大孔吸附树脂法纯化芦笋总皂苷的工艺。首先通过静态吸附法从13种树脂中选出芦笋总皂苷的最佳吸附树脂为D101大孔吸附树脂。利用单因素和正交实验设计,考察了各因素对纯化工艺的影响,确定最优工艺为总皂苷质量浓度5.44mg/ml(每ml相当于0.083g药材,含NaCl0.139g),吸附流速0.08ml/min·cm2,洗脱流速0.24ml/min·cm2,先用水和20%乙醇各8bv洗脱,然后用70%乙醇洗脱8bv。本工艺芦笋总皂苷提取率为19.5mg/g,产品纯度42.07%,纯化效率较高。 利用瘤重法、免疫器官重量法和白细胞计数法研究了芦笋总皂苷对S180、H22荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用。研究结果表明,芦笋总皂苷对S180和H22荷瘤小鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用,高剂量组对S180和H22抑瘤率分别达到39.53%(p<0.05)和34.81%(p<0.05),并呈现良好的量效关系,提示有较好的抗肿瘤作用;对小鼠免疫器官重量和血液中白细胞数的测定结果表明,芦笋总皂苷对小鼠的免疫系统有一定的保护促进作用。与阳性对照组相比,小鼠的体重增长率、脾脏指数、胸腺指数和白细胞数均与阴性对照组相关指标没有显著差异(p>0.05)。表明芦笋总皂苷可以通过提高小鼠机体免疫力而发挥抗肿瘤作用,有一定的免疫活性。