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端粒的生物学功能主要是保护染色体木端，避免核酸酶对染色体末端的降解，防止染色体之间发生融合和重排，在维持基因组结构的完整性和稳定上起重要作用。端粒酶由端粒酶逆转录酶(TERT)和端粒酶RNA(TRC)模板组成的具有特殊逆转录活性的核糖核蛋白复合物。PinX1是近年在人和酵母细胞中发现的一个能与端粒/端粒酶相互作用的保守核仁蛋白。
本研究的目的：进一步阐明PinX1在端粒酶/端粒调控中的作用和机制，以及其对端粒酶阳性肿瘤细胞的影响。方法：根据PinX1 mRNA序列设计PinX1shRNA，转入HT1080、HepG2和U2OS肿瘤细胞中进行稳定表达，以沉默它们内源PinX1的表达；然后分别检测这些shRNA PinX1的稳定肿瘤细胞系的细胞生长率和细胞衰老、DNA损伤诱导凋亡敏感性及端粒酶活性和端粒长度，接着进行Myc-POT1免疫共沉淀(IP)。结果：PinX1在人类肿瘤细胞系中遍在表达，沉默PinX1导致端粒酶阳性肿瘤细胞衰老，提高端粒酶阳性肿瘤细胞对DNA损伤诱导凋亡的敏感性，引起端粒酶阳性肿瘤细胞端粒缩短和功能紊乱，减少端粒酶与POT1端粒蛋白组分内源性结合。结论：本研究揭示了PinX1在端粒酶/端粒调控中也存在正调控作用；组成型表达PinX1有助于端粒酶介导的端粒维持和促进癌细胞的生长。