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第一部分 肺腺癌与癌旁组织中长链非编码RNA的表达谱及筛选目的：应用高通量lncRNA芯片检测肺腺癌组织和癌旁组织中差异表达的lncRNA,对其进行初步分析。方法分别提取6例肺腺癌病人的肺腺癌组织和癌旁组织中的RNA,体外逆转录制备并标记为ds-cDNA,与含有22000条lncRNA芯片进行杂交,计算机扫描并分析芯片荧光信号图像,筛选差异表达的lncRNA。结果在肺腺癌组织中差异表达的lncRNA达1025条,其中在肿瘤组织中高表达的lncRNA 464条,低表达的lncRNA561条(大于2倍变化且p<0.05)。根据筛选条件,选择SEQ_ID为AA311918的lncRNA(暂时命名为ZXF2)作为后续研究对象。结论肺腺癌的发生过程中lncRNA的表达谱发生明显变化,lncRNA与肺腺癌的发生密切相关。第二部分lncRNA ZXF2在40例肺腺癌中的表达情况及临床资料分析目的：验证40例肺癌标本中lncRNA ZXF2的高表达,探索该长链非编码RNA分子的高表达与临床病理资料之间的关系。方法：收集2010年6月至2012年2月武汉大学附属中南医院肺腺癌手术切除标本40例(包括癌组织和癌旁组织),荧光实时定量PCR检测40例标本中非编码RNA ZXF2的表达情况,分析其与临床病理之间的关系。结果：在40对标本中,有27对标本(67.5%)癌组织中lncRNA ZXF2的表达水平为对应的癌旁组织2倍以上(p<0.05)。高表达的lncRNA ZXF2与患者的肺腺癌分化程度(p=0.024)、TNM分期(p=0.016)、淋巴结转移(p=0.014)及临床分期(p=0.006)有关。高表达的lncRNA ZXF2和患者的术后生存期之间存在明显的负相关性(p<0.05)。结论：长链非编码RNA ZXF2在肺腺癌组织中显著高表达,高表达的lncRNA ZXF2与患者的肿瘤分期、转移情况及预后等方面存在紧密联系。第三部分siRNA靶向沉默A549细胞对lncRNA ZXF2表达的抑制作用目的：筛选具有高表达lncRNA ZXF2的肺腺癌细胞系,设计并筛选出具有最强干扰效率的siRNA。方法：选择3个肺腺癌细胞系A549、H1299、H1365,并分别进行了定量PCR实验,检测各细胞系lncRNA ZXF2的表达水平。设计能特异性抑制lncRNA ZXF2表达的3条siRNA片段,荧光实时定量PCR检测各组转染后lncRNA ZXF2的表达水平。结果：三个肺腺癌细胞系中,A549细胞具有相对较高的lncRNA ZXF2表达水平。序列为5’-GCUGUUGGAUGUCACACACTT-3’的siRNA-65具有最明显的基因沉默效应,可使目的基因的表达减少约70%。结论：A549细胞具有相对较高的lncRNA ZXF2表达水平,siRNA-65具有较强的抑制lncRNA ZXF2表达的作用。第四部分lncRNA ZXF2对肺腺癌细胞生长的作用目的：研究lncRNA ZXF2对肺腺癌细胞生长的作用。方法：用siRNA干扰ZXF2后,CCK-8法检测细胞生长,流式检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测相关蛋白的表达水平,Transwell检测细胞的迁移及侵袭能力。结果：干扰RNA ZXF2的表达可使肺腺癌细胞生长明显受到抑制(P<0.01),阻滞细胞周期(P<0.01)并抑制细胞的迁移和侵袭(P<0.01),负性影响c-Myc信号通路。结论：lncRNA ZXF2对肺腺癌细胞的生长具有促进作用,该作用可能通过参与c-Myc信号通路实现。ZXF2可能成为肺腺癌治疗中的重要分子靶点。