原代肝癌动物模型的建立与药效学研究

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目的:建立原代肝癌动物模型,用于抗肝癌药的药效评价研究。  方法:(1)原代肝癌模型的建立;收集219例肝癌组织标本,剔除坏死组织,将肝癌组织移植4只动物体内,接种3个月后,若肿瘤体积大于200mm3并不断增大,可判定模型成功。从临床肝癌组织保存时间,移植瘤块的大小,动物种属,接种位置与接种点数进行摸索与优化,建立第一代原代肝癌模型G1,随后将G1代接种至G2进行传代,依次类推,在传代过程中,收集肝癌组织块冻存于液氮罐中,建立原代肝癌组织库以用于将来的实验,同时将冻存后的肝癌组织进行复苏再接种,考察肝癌组织冻存后的活性。(2)肝癌原代模型病理学检测对于模型成功的病例,取每一代肝癌组织进行病理学检测,观察肝癌组织经历传代,病理组织学是否改变(3)原代肝癌模型药效学研究:采用同一病例,建立原代原位模型与原代皮下模型,并采用索拉菲尼,多柔比星与顺铂进行药效学研究,考察其对两种模型的敏感性。  结果:(1)肝癌原代模型的建立:接种219例,成功56例,成功率为25.57%,对于接种条件的摸索,肿瘤组织保存1小时较肿瘤组织保存2小时成功率高,而肿瘤块的大小为30mm3与动物皮下接种4点在保证成功率的同时,可以节省大量的人力物力。56例G1代成功的病例进行传代,结果55例成功,1例失败,成功率为98.21%,取25例G1代成功的病例进行冻存复苏后再接种,成功25例,成功率为100%。(2)经病理学检测,原代肝癌模型与临床标本保持一致。(3)原代肝癌模型药效学研究:两种模型肿瘤的生长方式不一样,原位模型更接近临床。给药后,索拉菲尼对原位模型与皮下模型均无明显抑制肿瘤生长的作用,而多柔比星与顺铂对两种肿瘤模型均有一定的抑制肿瘤生长的作用,但皮下模型的的肿瘤生长抑制率(TGI)分别为73.00%与91.15%,原位模型的肿瘤生长抑制率(TGI)分别为47.02%与59.09%,该两种抗癌药对肿瘤的敏感性皮下模型较原位模型高。  结论:(1)本研究成功建立了原代肝癌模型并对其进行优化,节省了大量的动物与人力物力。(2)原代模型的肿瘤组织与临床标本的病理组织学特点相近;(3)原位模型在肿瘤的生长方式更接近临床,对药物的敏感性与皮下模型不同。为了准确地评价抗癌药的药效作用,在皮下模型的基础上,需要用原位模型进一步验证。
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