大鼠钝挫伤白内障模型的建立及其晶状体上皮细胞的超微结构

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钝挫伤可导致多种眼部疾病,如前房角退缩,高眼压,角膜病变及白内障等。外伤性白内障是眼球发生穿孔伤或钝挫伤后最常见的并发症之一,其发病率为36%—52%,也是眼外伤致盲的主要原因之一,占视力致残者的28.2%。2001年Viestenz对1985—1995年间Erlangen眼球钝挫伤登记(EOCR)中417例因各种可避免的原因引起的外伤导致眼球钝挫伤及眼球破裂的回顾分析中指出:眼外伤占眼球摘除术病因的1/3,其中钝挫伤则是最主要病因。2001年松本直等建立了钝挫伤全白内障的C57/BL10小鼠模型。但是迄今 硕士研究生学位论文为止,对钝挫伤白内障发病机制的研究尚不多见,也未见到其晶状体上皮细胞凋亡超微结构的明确报道。本实验旨在寻找一种较为便捷,可靠的方法,快速建立一个稳定的钝挫伤白内障的动物模型,为进一步探讨钝挫伤白内障的发病机制提供实验模型,同时观察钝挫伤白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨细胞凋亡与钝挫伤白内障的关系。1.钝挫伤白内障动物模型的建立 本实验采用出生4周的雌性SD大鼠为实验对象,按随机原则分成五组,用 10%水合氯醛溶液门ml从g)腹腔注射致全麻:A组用109重量的小球从 10cm高度落下连续打击大鼠的左眼 100下,共 1次;B组用 10g重量的小球从 20cm高度落下连续打击大鼠的左眼100下,共 l次;C组用 209重量的小球从 20cm高度落下连续打击大鼠的左眼 100下,共 1次;D组用 209重量的小球从 20cm高度落下连续打击大鼠的左眼,每周一次,每次 100下,进行了五周;E组用209重量的小球从30cm高度落下连续打击大鼠的左眼,每周一次,每次 100下,进行了五周。裂隙灯下观察大鼠晶状体的变化。结果发现实验开始一周后,五组实验眼的晶状体均出现不同程度的混浊,但A组30大后完全恢复正常;B、C、D组晶状体混浊可持续存在,但只有D组出现典型的环状混浊。E组实验眼则出现晶状体以外的病变*上述结果进行统计学分析,B、C组门:20幻两种方法之间无统计学意义0刀.858列.of);C、D组(100次:100次 X 5)之间有统计学意义瞩-0刀18<0刀5);表明 D组方法门 重量 2. 硕士研究生学位论文的小球从 20cm高度落下连续打击大鼠的左眼,每周一次,每次 100下,进行数周)最适合用于建立钝挫伤白内障大鼠模型。2.钝挫伤白内障晶状体上皮细胞的超微结构 SD大鼠实验眼出现稳定的晶状体混浊后,用 10%水合氯醛溶派门ml/kg)腹腔注射致全麻。在全麻状态下将其双眼角膜剪开,切除虹膜,用撕囊镊自赤道部小心撕取大鼠晶状体前囊膜。获得的晶状体前囊膜,常规方法制成电镜标本,用透射电镜观察钝挫伤白内障大鼠晶状体上皮细胞的超微结构。实验眼电镜标本随机选取5个视野,分别与自身对照眼电镜标本的5个视野比较。结果发现出现混浊的B、C、D组实验眼晶状体上皮细胞的超微结构均有不同程度的改变,只有D组实验眼的晶状体上皮细胞出现明显细胞凋亡的超微结构改变,而各组自身对照眼晶状体上皮细胞超微结构无明显改变。说明钝挫伤白内障的发生与其晶状体上皮细胞凋亡有关。 本实验说明钝挫伤是发生并发性白内障的较为确切的病因;同时通过实验发现:209重量的物体由20cm高度落下,反复多次打击SD大鼠眼球能较快产生稳定的白内障,因此建议采用该种方法u 重量的小球从20cm高度落下连续打击大鼠的实验眼,每周一次,每次 100下,进行数周)建立钝挫伤白内障动物模型。另外,本实验提示钝挫伤白内障的发生与其晶状体上皮细胞凋亡有关。
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