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呼吸道黏膜是多种病原微生物入侵机体的门户。病原通过呼吸道侵入机体后会导致多种疾病的发生,如禽流感、新城疫和传染性支气管炎等。这些疾病的发生严重危害鸡群健康,给养禽业造成巨大的经济损失。因此,提高动物机体呼吸道黏膜免疫力十分关键。脂肽是一种能有效降低表面张力的微生物代谢产物,已有研究表明其具有抗细菌、真菌、支原体、寄生虫等多种病原微生物的作用。但关于脂肽对动物机体黏膜免疫力的影响尚未有报道。本研究应用表面活性素(surfactin)、泛革素(fengycin)和伊枯草菌素(iturin)三种脂肽分别给鸡滴鼻,检测其对鸡呼吸道黏膜细胞免疫和体液免疫的影响。此外,我们在体外研究了三种脂肽对鸡树突状细胞表型和功能的影响。为进一步研究表面活性素对树突状细胞的作用,我们借助小鼠树突状细胞模型深入研究了表面活性素对树突状细胞成熟的影响。我们的研究为将脂肽,尤其是表面活性素,作为一种有效的呼吸道黏膜免疫增强剂提供了一定的理论基础。本研究内容主要分为以下四个部分:1脂肽滴鼻对鸡呼吸道细胞因子表达水平的影响本试验应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素这三种脂肽分别给鸡滴鼻,滴鼻后3天通过检测鼻腔和气管中的IL-1β、IL-6、IL-12和IFN-γ的含量,来评价鸡呼吸道黏膜细胞免疫的水平。结果显示:应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素给鸡滴鼻后,鸡鼻腔和气管中的IL-1β、IL-6、IL-12和IFN-γ表达水平均有不同程度的提高,其中表面活性素对上述细胞因子的促分泌作用要强于泛革素和伊枯草菌素。结果表明:滴鼻表面活性素、泛革素和伊枯草菌素均能提高鸡呼吸道黏膜细胞免疫的水平,其中表面活性素的作用最为显著。2脂肽滴鼻对鸡IgA表达水平的影响本试验应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素这三种脂肽分别给鸡滴鼻,滴鼻后第3、14、28天通过检测鼻腔涮洗液、气管涮洗液中分泌型IgA的含量和血清中IgA的含量,来评价鸡体液免疫的水平。结果显示:应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素给鸡滴鼻后,鸡鼻腔涮洗液、气管涮洗液中分泌型IgA的含量以及血清中IgA的含量均有不同程度的提高,其中表面活性素促进黏膜部位分泌型IgA和血清中IgA分泌的作用要强于泛革素和伊枯草菌素。结果表明:滴鼻表面活性素、泛革素和伊枯草菌素均能提高鸡体液免疫的水平,其中表面活性素的作用最为显著。3脂肽对鸡树突状细胞成熟的影响本试验应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素这三种脂肽在体外分别作用鸡骨髓源树突状细胞,检测树突状细胞表型MHCⅡ的表达水平,并进一步研究脂肽作用后树突状细胞刺激T细胞增殖能力的变化。结果显示:应用表面活性素、泛革素和伊枯草菌素作用鸡树突状细胞后,树突状细胞表面的MHCⅡ表达水平均有所提高,其中表面活性素的作用最为显著。但只有表面活性素能够提高树突状细胞刺激T细胞增殖的能力。结果表明:表面活性素、泛革素和伊枯草菌素均能促进鸡树突状细胞表型的成熟,但只有表面活性素能促进鸡树突状细胞功能上的成熟。4表面活性素对小鼠树突状细胞成熟的影响在上一章中发现,虽然表面活性素、泛革素和伊枯草菌素均能促进鸡树突状细胞表型上的成熟,但只有表面活性素能促进鸡树突状细胞功能上的成熟,因此本试验在小鼠树突状细胞上进一步研究表面活性素促进树突状细胞成熟的作用。本试验应用表面活性素在体外作用小鼠骨髓源树突状细胞,通过检测树突状细胞的形态、表型、分泌细胞因子的能力、迁移能力和促进CD4+T细胞增殖的能力,来评价表面活性素小鼠树突状细胞成熟的影响,并与鸡树突状细胞相比较。此外,通过Western-blot检测树突状细胞细胞质中IκB-α的含量和细胞核中p65的含量,研究NF-κκB信号通路是否参与表面活性素诱导的树突状细胞成熟过程。结果显示:应用表面活性素作用小鼠树突状细胞后,树突状细胞树突伸长,MHCⅡ和CD40表达水平上调,IL-6和TNF-α分泌量增加,迁移能力和促进CD4+T细胞增殖的能力均有显著提升。树突状细胞细胞质中IκB-α的表达水平显著降低而细胞核中p65的表达水平显著升高。结果表明:表面活性素能促进小鼠树突状细胞形态、表型和功能上的成熟,并且NF-κB信号通路参与了这一过程。