【摘 要】
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缺血性脑血管病(ischemia cerebral vascular disease,ICVD)是严重危害人类健康的疾病,发病机制复杂,但最终都会造成神经细胞的损伤,进而影响患者的预后.无菌条件下进行PC12
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缺血性脑血管病(ischemia cerebral vascular disease,ICVD)是严重危害人类健康的疾病,发病机制复杂,但最终都会造成神经细胞的损伤,进而影响患者的预后.无菌条件下进行PC12细胞培养.首先,利用MTT染色法确定H2O2诱导PC12细胞凋亡的最佳浓度和时间.然后,取同一代PC12细胞,细胞生长至亚融合状态时,随机分为9组:正常组、损伤组、灯盏乙素高浓度组(1.2×1 0〈-1〉mg/L)、灯盏乙素中浓度组(3.0×10〈-2〉mg/L)、灯盏乙素低浓度组(7.5×10〈-3〉mg/L)、葛根素高浓度组(1.6mg/L)、葛根素中浓度组(4.0×10〈-1〉mg/L)、葛根素低浓度组(1.0×10〈-1〉mg/L)、两药合用组(1.5×10〈-2〉mg/L灯盏乙索+2.0×10〈-1〉mg/L葛根素).各用药组给予相应浓度的药物,继续培养24h.药物作用20h时,给药组与损伤组一起分别加入10mmol/L H〈,2〉O〈,2〉溶液(终浓度为100 μmol/L),继续培养4h.MTT法检测PC12细胞存活率;倒置相差显微镜下进行一般形态学观察;透射电子显微镜下进行超微结构观察;流式细胞术测定PC12细胞凋亡率;比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;比色法测定细胞培养液和细胞内超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(malondialdelyde,MDA)水平.
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