【摘 要】
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目的：观察不同浓度棕榈酸(palmiticacid,PA)对大鼠胰岛INS-1细胞的脂毒性作用，探讨线粒体途径是否介导PA诱导的胰岛β细胞INS-1凋亡及其可能机制。方法：以大鼠INS-1胰岛β细胞株
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目的：观察不同浓度棕榈酸(palmiticacid,PA)对大鼠胰岛INS-1细胞的脂毒性作用，探讨线粒体途径是否介导PA诱导的胰岛β细胞INS-1凋亡及其可能机制。方法：以大鼠INS-1胰岛β细胞株为实验对象，在含或不含PA(0.25-1.0mmol／l)的RPMI1640无血清培养基体外培养24h，构建游离脂肪酸PA诱导β细胞INS-1脂性凋亡模型；MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活力，反映细胞线粒体功能改变；Hoechst33342/PI活细胞荧光染色法观察INS-1细胞核形态改变，测定细胞凋亡率；RT-PCR法检测0.5mM棕榈酸干预下细胞caspase-3、caspase-9、Bcl-2、AIFmRNA的表达。结果：在无血清条件下，棕榈酸干预24h能显著诱导INS-1细胞凋亡。不同浓度PA处理INS-1细胞，镜下可观察到细胞呈浓度依赖的毒性改变。与正常细胞相比，PA组细胞随PA浓度增加形态逐渐消失，多数细胞收缩甚至呈圆形。MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活力，不同浓度棕榈酸干预下，OD值降低显著(p<0.05)；Hoechst33342染色在荧光显微镜下观察细胞的凋亡细胞核呈致密浓染或呈碎块状致密浓染，可见明显核碎裂。0.5mmol/LPA组细胞的凋亡率可达到56.6%，与同浓度对照BSA组相比有显著差异(p<0.01，n=8)；RT-PCR显示促凋亡因子caspase-3、caspase-9、AIF表达较BSA组上调，而抗凋亡因子Bcl-2表达下调，提示内源性即线粒体凋亡途径参与PA脂毒性效应。结论：PA对INS-1细胞具有明显脂毒性作用，且细胞损伤与凋亡有关，尤其是可能通过线粒体凋亡途径介导胰岛β细胞凋亡。
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