【摘 要】
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目的:肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是临床常见的引起患者腹痛、腹胀、腹部不适等症状的功能性消化道疾病,在全球发病率较高,并严重影响患者的生活质量和过分占用医疗卫生资源。然而,目前对于IBS的发病机制了解仍然不足,有效的治疗措施亟待研究发现。近年来研究表明,IBS的发生与肠道运动功能密切相关,而5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和
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目的:肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是临床常见的引起患者腹痛、腹胀、腹部不适等症状的功能性消化道疾病,在全球发病率较高,并严重影响患者的生活质量和过分占用医疗卫生资源。然而,目前对于IBS的发病机制了解仍然不足,有效的治疗措施亟待研究发现。近年来研究表明,IBS的发生与肠道运动功能密切相关,而5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)则是影响肠道运动的关键物质。有研究表明,SERT的水平受肠道菌群的影响。大量的基础和临床实验都证实了益生菌对于IBS的治疗有着很好地疗效。然而,益生菌治疗IBS的机制尚不明确。历史研究表明,鼠李糖乳杆菌上清液作用于肠上皮细胞和感染后IBS小鼠的结肠组织可以引起SERT水平上调。枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌是常用的三种益生菌类型,然而,对于此三种益生菌是否也可以对SERT表达进行调控尚无证据。本研究旨在观察枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌上清对肠上皮细胞SERT蛋白的表达有无影响,进而影响5-HT的水平,从而为益生菌缓解IBS症状的作用机制提供理论依据。方法:本实验分别用3种不同浓度梯度的枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌上清分别刺激Caco-2细胞和HT-29细胞12小时和24小时。应用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测相应细胞SERT mRNA和蛋白的表达水平,并进一步应用SPSS软件进行统计学分析,用均数±标准差表示检测结果,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.枯草芽孢杆菌上清液对Caco-2细胞SERT表达有上调作用,且上调表现为浓度-依赖性,随时间表现为上调程度先大后小;对HT-29细胞SERT的表达的上调出现在早期,24小时的表达已回落,且有浓度-依赖性。2.粪肠球菌上清液上调Caco-2细胞的SERT mRNA的程度先大后小,表现为浓度-依赖性;对HT-29细胞的SERT蛋白表达的上调作用存在两个高峰,且呈浓度-依赖性。3.屎肠球菌上清液上调Caco-2细胞的SERT表达水平,且呈时间-和浓度-依赖性;对HT-29细胞SERT蛋白的表达上调出现在早期,无浓度-依赖性,但是高浓度刺激时可能存在第二上调高峰。4.枯草芽孢杆菌和屎肠球菌上清液1:1混合液对于HT-29细胞和Caco-2细胞的SERT调节作用虽然有上调,但不同于其中每种益生菌单独作用时的效应。结论:枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌上清液均可以上调SERT mRNA和蛋白的表达,但是其调节程度和特点不尽相同;且枯草芽孢杆菌和屎肠球菌1:1混合上清对SERT mRNA和蛋白的调节机制可能较其中每种益生菌单独作用时更为复杂。
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