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LHRH-Ang重组毒素的构建及其抗肿瘤效应的实验性研究恶性肿瘤是危及人类健康的主要疾病之一。尽管到目前为止化疗和放疗仍然是恶性肿瘤病人术后及手术禁忌症的一线治疗措施，但由于它们在杀伤肿瘤细胞的同时也不加选择的损害正常细胞和组织，所以疗效不尽如人意，人们迫切需要特异性抗肿瘤治疗方法，因此靶向药物治疗已逐步成为肿瘤治疗研究中的热点。靶向药物治疗就是将肿瘤特异性抗体等靶向物质与毒性分子如动植物毒素等用化学方法偶联起来或用基因融合的方法将各自的基因连接起来表达融合蛋白，制成具有特异性结合靶细胞及杀细胞毒性作用的靶向药物。它可以选择性地杀伤相应的抗原细胞或受体相关细胞，对其他无关细胞无影响或影响较小。因此在临床上对肿瘤的治疗有积极重要的作用。
本研究通过基因工程方法以人促黄体激素释放素(LHRH)作为载体，以人血管生成素(Ang)作为毒性弹头部分，通过基因融合将两种基因通过Linker连接起来，构建了融合蛋白基因LHRH-Linker-Ang，并在大肠杆菌中进行了表达，该重组蛋白的两部分均为人源蛋白，所以应不会在人体内产生免疫反应。
本实验利用PCR技术扩增出LHRH-PⅡ基因片段，并将其克隆到pMD18T载体中，获得了重组质粒pMD18T/LHRH-PⅡ。LHRH-PⅡ-Ang重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式表达，其表达量占菌体蛋白总量的18.43％。探索了重组蛋白的优化表达条件，通过细胞裂解、8M尿素的变性溶解和DEAE几步纯化过程，获得了纯度达85％的目的蛋白。用梯度透析法对变性蛋白进行了复性，获得了可溶的复性蛋白，其浓度为1.27mg/ml。细胞学检测表明复性蛋白对两种过度表达LHRH受体的肿瘤细胞Hep2和CNE具有明显的细胞毒性，而对不表达LHRH受体的BKH细胞则没有明显的生长抑制作用。结晶紫法检测LHRH-PⅡ-Ang对Hep2和CNE细胞的IC50分别为21.37μg/ml和28.61μg/ml。
本研究构建了以LHRH为靶向载体的重组毒素LHRH-PⅡ-Ang，并检测了该重组毒素对鼻咽癌细胞CNE和喉癌细胞Hep2两种头颈部肿瘤细胞的细胞毒性作用，结果显示，这两种头颈部肿瘤细胞对该重组毒素都很敏感，细胞生长的抑制程度与毒素剂量呈正相关，也与毒素的作用时间呈正相关。