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目的:研究选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂celecoxib对人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP细胞是否有增殖抑制作用及可能机制,探讨celecoxib逆转人卵巢癌耐药株SKOV-3/DDP细胞耐药性作用及可能机制。方法:1用不同浓度顺铂作用于人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞及人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP细胞24h后,MTT比色法测定顺铂（DDP）对各组细胞的抑制率,计算亲本细胞株及耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50),判定SKOV-3/DDP细胞的耐DDP情况。2用不同浓度celecoxib作用于人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP细胞,各浓度分别作用不同时间（24h、48h、72h）后,四甲基偶氮唑蓝（tetrzolium-based colorimetric assay,MTT）比色法测定不同药物浓度组,作用不同时间后对SKOV-3/DDP细胞的抑制率,同时测定celecoxib应用24小时非细胞毒性剂量:取约10%抑制浓度（inhibiting concentration,IC10）作为药物逆转作用浓度。3在联合celecoxib非细胞毒性浓度作用下测定顺铂对SKOV-3/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50),以此判断celecoxib能否增加耐药细胞对DDP的敏感性,逆转耐药。4流式细胞仪分别测定单用DDP、单用celecoxib以及联合后对SKOV-3/DDP细胞凋亡的影响。5应用流式细胞术（flowcytometry, FCM）测定人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞及人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP细胞中GST-π含量。6流式细胞术分别定量检测单用celecoxib干预不同时间、单用DDP组及DDP联合celecoxib组SKOV-3/DDP细胞中Survivin、GST-π蛋白表达的变化;7.逆转录-聚合酶链反应（revers transcription PCR,RT-PCR）法半定量检测上述各组人卵巢癌耐药细胞SKOV-3/DDP细胞中Survivin、GST-πmRNA表达的变化。结果:1 DDP对SKOV-3细胞的IC50为10.119μΜ,对SKOV-3/DDP的IC50为27.815μΜ,耐药倍数约为2.75倍。2单独应用celecoxib作用SKOV-3/DDP细胞后,随着药物浓度增高,抑制率相应增高。在celecoxib作用24h后各浓度组抑制率分别为0.564%、4.992%、9.089%、24.074%、44.104%、59.323%,与对照组比较,2.5μΜ无明显抑制,余各组均有统计学意义（P﹤0.01）。同一浓度随着作用时间的延长,抑制率增大,逆转浓度（10μM）分别作用24h、48h、72h后抑制率分别为9.089%、25.448%、30.635%,与对照组比较同样具有显著性差异（P﹤0.01）。Celecoxib对SKOV-3/DDP细胞作用24h后IC10为8.247μΜ。3经联合非细胞毒性剂量celecoxib作用于SKOV-3/DDP细胞24h后,耐药细胞对DDP的IC50从27.815μΜ降至15.437μΜ,耐药逆转倍数约为1.8倍,celecoxib可以部分逆转SKOV-3/DDP细胞的耐药。4单药或者联合应用干预SKOV-3/DDP细胞后凋亡率分别为:对照组5.105%,celecoxib组7.67%,DDP组16.99%,DDP联合celecoxib组达到32.75%。用药组与对照组比较差异（P﹤0.01）显著,联合组与单用DDP组相比凋亡率差异显著（P﹤0.01）,celecoxib可促进DDP抗肿瘤诱导凋亡作用。5耐药细胞与原代细胞相比,耐药相关蛋白GST-π蛋白表达差异显著,耐药细胞的FI值约为亲本细胞的1.034倍（P<0.05）。6经celecoxib作用SKOV-3/DDP细胞24h、48h、72h后,survivin及GST-π蛋白的FI值较对照组减少（P<0.01）,随着作用时间延长, survivin蛋白的FI值持续减少,分别为:0.994,0.951,0.945,48小时后趋势减缓,其中用药48小时与用药72小时相比,FI值无统计学意义。但是GST-π蛋白的FI值分别为:0.973,0.941,0.963,在作用72h后较作用48h反而升高;但实验组与对照组比较,统计学意义明显。7单用DDP组和DDP联合celecoxib组survivin蛋白较对照组均减少,分别为0.984,0.939,DDP联合celecoxib后survivin蛋白表达量较单用DDP明显减小,两组相比较差异显著（P﹤0.01）。但是GST-π蛋白的FI值在应用顺铂后增高明显,为1.056,与对照相比差异显著（P<0.01）,应用celecoxib后较单药DDP下降明显,为0.962,两组比较有统计学意义（P<0.01）。8.随着celecoxib作用时间延长,survivin mRNA表达量也持续下降, survivin/GAPDH分别为0.711,0.701,0.518,0.475 ,与对照组相比,差异显著（P<0.05）。GST-π/GAPDH与对照组相比,随着作用时间延长,比值持续下降。分别为0.877,0.624,0.463,0.545,与对照比较有明显差异（P﹤0.05）。9单用DDP组、联合celecoxib DDP组Survivin/GAPDH值较对照组均减少（P<0.01） ,为0.496、0.34,且联合用药组较单药组下降明显。GST-π/GAPDH值在应用顺铂后反应性增高至0.987（P<0.01）。应用celecoxib后该比值可下降为0.925,两组比较有统计学意义（P<0.05）。结论: 1 celecoxib单独应用在一定浓度范围内能有效抑制人卵巢癌耐药细胞SKOV-3/DDP细胞增殖,并呈浓度及时间依赖性;2 celecoxib联合顺铂对SKOV-3/DDP细胞增殖抑制具有协同增效作用,celecoxib可增强顺铂的抗SKOV-3/DDP作用,促进凋亡,逆转耐药。3 celecoxib逆转耐药的机制可能与下调survivin mRNA及蛋白表达,下调GST-πmRNA及蛋白表达有关。4本实验证实了celecoxib可以作为一种理想的MDR逆转剂进行后续研究。