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乙嘧酚磺酸酯(Bupirimate,BP)是一种广泛应用于水果、蔬菜、花卉以及大田作物白粉病控制的嘧啶类杀菌剂。BP作为一种应用广、使用量大、效果较好的农药,其为农业生产带来巨大的经济效益的同时,由于其残留问题也为人类健康和生态环境带来了潜在的威胁。目前国内外对BP的检测方法主要是高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)、气相色谱法(Gas chromatography, GC)和气相色谱-质谱联用(Gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)法等,但是这些方法对仪器条件要求高,费用昂贵,且样品的前处理操作过程相对复杂,耗时。因此,需要建立一种有效、快速、简便、灵敏、费用低廉的方法来检测残留在粮食、蔬菜、水果以及环境中的BP的量。免疫分析技术特别是酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)不需要昂贵的仪器设备,且特异性强、灵敏度高、操作简便快速,可以在现场检测大量样本,具有独特的优势。本研究采用戊二醛法将BP与牛血清蛋白(Bovine serum albumin, BSA)和卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)偶联,成功合成了人工抗原BP-BSA和BP-OVA。用BP-OVA免疫BALB/c小鼠,获得了高效价和高灵敏度的抗血清。通过ELISA方阵滴定,确定最佳抗原包被浓度为0.5μg/mL,最佳抗体工作浓度为4000×稀释的抗血清。通过间接竞争ELISA法测得的标准曲线,得出IC50为19.95μg/mL,最低检测限为0.32ng/mL。利用淋巴细胞杂交瘤技术制备并筛选出一株稳定分泌BP抗体的的杂交瘤细胞株,其染色体数目为98条,分泌抗体的亚型为IgG2b,抗体效价达到1：1.024×106。为进一步建立BP的间接竞争ELISA法和检测食品和环境中BP的残留量打下了基础。