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目的：
观察1-103nmol/LProtein A纯化抗钠-钙交换体(NCX)α-1(138-177)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响；在使用抗原亲和纯化方法进一步纯化抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体的基础上，分别观察其对大鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换体、L-型钙通道、内向整流钟通道和瞬时外向钾通道电流的影响。
方法：
1.离体心脏灌流：用Protein A纯化抗Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体灌流正常大鼠离体心脏，利用Langendorff离体灌流系统观察其对正常大鼠离体心功能的影响，观测指标包括左室发展压(LVSP-LVDP)、左室最大上升速率（+dP/dtmax）和左室最大下降速率（-dP/dtmax）。同时观察NCX特异性阻断剂KB-R7943对大鼠心功能的作用。
2.抗体的抗原亲和纯化：利用抗原亲和纯化柱对多肽抗体进行亲和纯化，并对纯化后的抗体进行ELISA检测，确定抗体效价。
3.膜片钳全细胞记录：应用膜片钳全细胞记录模式观察抗原亲和纯化后的抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体对心肌细胞Na+/Ca2+交换电流、L-型钙电流、内向整流钾电流和瞬时外向钾电流的影响。
结果：
1.Protein A纯化抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体对正常大鼠离体心功能的影响：与对照组相比，1-10nmol/Lα-1抗体可使正常大鼠离体心脏左室发展压(LVSP-LVDP)和左室压最大上升速率(+dP/dtmax)明显增加（P＜0.01）（表1，图1.1，1.2，1.3，1.4），并使左室压最大下降速率(-dP/dtmax)减小(P＜0.01)（表1，图1.1，1.2，1.3，1.4），且KB-R7943(2μmol/L)可使α-1抗体(1nmol/L)的上述效应进一步增强。然而，102-103nmol/Lα-1抗体则可使大鼠离体心脏LVSP-LVDP、±dP/dtmax呈不同程度地下降（P＜0.01）（表1，图2.1，1.2，1.3，1.4）。
2.抗体效价、浓度及纯化结果：问接ELISA法检测结果显示，经抗原亲和纯化柱亲和纯化后，抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗血清效价为1∶32000，抗体浓度为0.5mg/ml（表2.1）。
3.抗原亲和纯化后抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体对成年大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流及其他离子通道电流的影响：全细胞膜片钳记录结果表明，在0.1-102μg/mL浓度范围内，抗α-1(138-177)抗体对大鼠心肌细胞外向及内向Na+/Ca2+交换电流均呈现出剂量依赖性地抑制作用（表2.2，图2.1）。对该抗体的进一步研究表明，0.1-10μg/mL的该抗体对L-型钙电流没有作用，而102μg/mL的抗α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用（表2.3，图2.2）。该抗体在0.1-102μg/mL浓度范围内对内向整流钾电流和瞬时外向钾电流均未见明显作用（图2.3、2.4）。
结论：
1.低浓度Protein A纯化α-1(138-177)(1-10nmol/L)抗体可明显增强心肌收缩，高浓度Protein A纯化α-1(138-177)(102-103nmol/L)抗体对心肌的收缩和舒张均有抑制作用。
2.抗α-1(138-177)抗体经抗原亲和纯化后，获得了浓度和纯度都较高的抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体，为后续对其功能进行进一步实验研究奠定了基础。
3.在浓度为0.1-10μg/mL范围内，抗原亲和纯化后的抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体可特异性地抑制大鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换体，对L-型钙通道电流、内向整流钾电流和瞬时外向钾电流均未见明显影响。为今后对NCX功能进行深入研究提供了一种可用的工具药。