依诺沙星对骨肉瘤143B细胞及异种移植瘤抑制作用研究

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目的:探讨依诺沙星对骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及对小鼠异种移植瘤体积影响。方法:1.骨肉瘤143B细胞分别用不同浓度依诺沙星药物处理,将未接受药物处理的细胞作为对照组实验,分别用CCK-8实验、细胞克隆实验、transwell侵袭实验、Annexin V/PI细胞凋亡实验检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡能力。Western blot分析Bcl-xL、Bxl-2、MMP2和MMP9的蛋白表达水平;2.向裸鼠胫骨平台内注射100ul浓度为1×10~7个/ml骨肉瘤143B细胞悬液,建立小鼠异种移植瘤模型,并用不同浓度依诺沙星(生理盐水稀释)行腹腔注射,将未接受注射治疗组作为对照组,每周测小鼠肿瘤体积和小鼠体重的变化。4周后取麻醉后小鼠心脏血,做肝肾功能和血细胞检测,评测依诺沙星在小鼠体内血液学副作用。并在小鼠安乐死后,解剖出瘤子并测其重量与体积,观察各组差异。结果:1.CCK-8实验、细胞克隆实验、transwell侵袭实验、Annexin V/PI细胞凋亡实验表明依诺沙星可抑制143B细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导其凋亡(p<0.05);2.Western blot分析显示MMP2、MMP9、Bcl-xL和Bxl-2蛋白表达均降低(p<0.05),表明依诺沙星下调143B细胞中MMP2和MMP9蛋白表达可能是抑制骨肉瘤转移的有效途径,而下调Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达,可能是触发了骨肉瘤143B细胞线粒体凋亡途径。3.依诺沙星治疗的小鼠肿瘤的体积和重量明显低于对照组的小鼠(p<0.05),而生理盐水组和对照组之间肿瘤的体积或重量没有显著差异(p≧0.05)。在研究期间,各组间小鼠体重没有显著差异(p≧0.05)。这些数据表明依诺沙星对骨肉瘤的生长可能具有抑制作用,并在裸鼠体内没有明显的药物毒性。4.在小鼠心脏血的肝肾功能检测中未发现接受诺沙星治疗后各组小鼠肝肾功能异常,而小鼠的红细胞、白细胞和血小板计数也均在正常范围内。表明依诺沙星在本实验的剂量范围内没有明显的血液学副作用。结论:依诺沙星抑制骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和促进其凋亡。在动物实验中,依诺沙星缩小小鼠异种移植瘤体积。依诺沙星在治疗骨肉瘤方面可能是一种很有前途的新药,值得在临床研究中进一步研究。
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