触须感觉信息输入减少诱导桶状皮层锥体神经元和GABAergic神经元功能的可塑性

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candycandy726
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目的:建立小鼠触须感觉信息输入减少的动物模型,分析触须感觉信息输入减少后,桶状皮层(Barrel Cortex)锥体神经元和GABA能神经元内在特性和神经元群集发放动作电位编码功能的变化,探讨神经网络功能的可塑性机制。方法:1.小鼠触须感觉信息输入减少模型的建立:将FVB-Tg(Gad GFP)4570Swn/J小鼠右侧嘴角部全部触须修剪至小于1mm,每24小时修剪一次,从出生后7天开始修剪持续到出生后17天。2.在上述处理10天以后,应用T迷宫实验检测小鼠嗅觉功能变化,实验中小鼠移动到食物一侧的成功率作为鉴别其嗅觉功能上调的指标。3.膜片钳电生理实验:取出生1周后小鼠,连续造模后10天,用异氟烷吸入麻醉,迅速将大脑分离,做冠状切片(400μm),然后将脑片置于氧合的人工脑脊液(ASCF)中,25C下孵育1-2小时后转移至灌流槽,在31C下对脑片进行灌流;采用IR-DIC光学显微镜(Nikon E600FN)荧光显微镜定位大脑桶状皮层绿色荧光蛋白标记的GABA能神经元和锥体神经元;运用Axoclamp-200B放大器,电流钳模式全细胞记录方法记录大脑桶状皮层GABA能神经元和锥体神经元的动作电位,测量其发放容量及阈电位(threshold potentials, Vts),电压钳模式全细胞记录方法采集GABA能神经元sIPSCs(自发性抑制性突触后电流)包括电流间距(Interval of Events,IE)和电流幅度(Amplitude)数据,信号数据输入Clampex10.1进行处理分析。结果:1.造模组小鼠对食物的正确选择成功率明显高于正常组小鼠;2.应用膜片钳方法,电流钳模式实验结果发现,与正常组相比,造模组桶状皮层锥体神经元群集发放动作电位的发放容量显著增加,动作电位间距ISI缩短(P<0.05),阈电位(Vts)降低(P<0.05);GABA能神经元群集发放动作电位的发放容量显著降低,动作电位间距ISI延长(P<0.05),阈电位(Vts)升高(P<0.05);3.电压钳模式实验结果发现,与正常组相比,造模组桶状皮层GABA能神经元的sIPSCs的电流间距延长(P<0.05),电流幅度降低(P<0.05)。结论:1.触须感觉信息输入减少后,小鼠嗅觉功能上调;2.小鼠触须感觉信息输入减少,桶状皮层锥体神经元功能上调,GABA能神经元功能下调;桶状皮层兴奋性神经元功能上调和抑制性神经元功能下调导致神经网络整体功能增强。
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