【摘 要】
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目的:通过建立硝酸甘油型慢性偏头痛大鼠动物模型,探讨复方藜芍片改善慢性偏头痛大鼠头痛的机制。方法:将60只SD雄性大鼠随机分成6组:对照组(Control,n=10)、慢性偏头痛组(Migraine,n=10)、复方藜芍片低剂量组(FFLSP-L,420㎎/㎏,n=10)、复方藜芍片中剂量组(FFLSP-M,840㎎/㎏,n=10)、复方藜芍片高剂量组(FFLSP-H,1680㎎/㎏,n=10)和
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目的:通过建立硝酸甘油型慢性偏头痛大鼠动物模型,探讨复方藜芍片改善慢性偏头痛大鼠头痛的机制。方法:将60只SD雄性大鼠随机分成6组:对照组(Control,n=10)、慢性偏头痛组(Migraine,n=10)、复方藜芍片低剂量组(FFLSP-L,420㎎/㎏,n=10)、复方藜芍片中剂量组(FFLSP-M,840㎎/㎏,n=10)、复方藜芍片高剂量组(FFLSP-H,1680㎎/㎏,n=10)和盐酸氟桂利嗪组(FH,1㎎/㎏,n=10)。复方藜芍片各剂量组和盐酸氟桂利嗪组按照相应剂量进行灌胃,正常组、慢性偏头痛组分别给予等量生理盐水灌胃。各组大鼠按照0.1 m L/kg容积连续灌胃给药30天,每天1次。分别在各组大鼠灌胃的第18、21、24、27、30天,按照10 mg/kg用量于大鼠颈部皮下注射硝酸甘油溶液。慢性偏头痛组、复方藜芍片低剂量组、复方藜芍片中剂量组、复方藜芍片高剂量组均需制备偏头痛模型,对照组大鼠注射等体积生理盐水。造模后记录大鼠挠头次数和耳红持续时间测试大鼠头痛缓解情况。Griess试剂检测血清NO含量;qRT-PCR法检测各组大鼠血浆iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA及硬脑膜iNOS、IL-1β、TNF-αmRNA表达;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α及硬脑膜IL-1β、TNF-α的蛋白水平;Western blot检测硬脑膜iNOS、CGRP、TLR4、My D88表达量和ERK1/2、JNK1/2、p38蛋白磷酸化水平。结果:(1)行为学实验结果显示:与对照组比较,慢性偏头痛组大鼠挠头次数明显增加(P<0.05),耳红持续时长显著延长(P<0.05);与慢性偏头痛组比较,复方藜芍片中、高剂量组大鼠挠头次数明显减少(P<0.05),耳红持续时长显著缩短(P<0.05)。(2)qRT-PCR法结果显示:与对照组比较,慢性偏头痛组大鼠血浆促炎因子iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA及硬脑膜促炎因子iNOS、IL-1β、TNF-αmRNA表达均明显升高(P<0.05);与慢性偏头痛组比较,复方藜芍片中、高剂量组大鼠血浆促炎因子iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA及硬脑膜促炎因子iNOS、IL-1β、TNF-αmRNA均明显下调(P<0.05)。(3)ELISA检测结果显示:与对照组比较,慢性偏头痛组血清促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α及硬脑膜促炎因子IL-1β、TNF-α的水平明显升高(P<0.05);而复方藜芍片中、高剂量组血清促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α及硬脑膜促炎因子IL-1β、TNF-α的水平较慢性偏头痛组大鼠则显著下降(P<0.05)。(4)Western blot检测结果显示:与对照组比较,慢性偏头痛组硬脑膜炎症蛋白iNOS、CGRP,及TLR4-MAPK通路中TLR4、My D88、p-ERK1/2、p-JNK1/2、p-p38蛋白表达量均显著高于慢性偏头痛组(P<0.05);同时,复方藜芍片中、高剂量组硬脑膜上述蛋白表达量均显著低于慢性偏头痛组(P<0.05)。结论:复方藜芍片能够抑制TLR4-MAPK信号通路,下调促炎因子表达,减轻外周血及硬脑膜炎症反应,缓解头痛。
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