【摘 要】
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目的：制备CD20融合蛋白及制备CD20的单克隆抗体(mAb)，并对其进行特性鉴定。 方法：以人单核细胞cDNA文库为模板，构建重组表达质粒pGEX—4T—1CD20(即CD20—GST)和pET—32a—CD2
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目的：制备CD20融合蛋白及制备CD20的单克隆抗体(mAb)，并对其进行特性鉴定。
方法：以人单核细胞cDNA文库为模板，构建重组表达质粒pGEX—4T—1CD20(即CD20—GST)和pET—32a—CD20(即CD20—His)。以融合蛋白CD20—GST为免疫源免疫BALB/c雌性小鼠制备(mAb)，用间接ELISA法测定抗体的效价，Westernblot、免疫荧光鉴定其特异性及免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。
结果：CD20—GST和CD20—His蛋白在大肠杆菌中可高效表达，经纯化后可获得高纯度的CD20蛋白，经细胞融合得到1株稳定分泌CD20抗体的杂交瘤细胞株，Western blot和免疫组化显示抗CD20 mAb与CD20蛋白具有良好的反应性。
结论：成功制备高纯度CD20蛋白并以此为抗原制备了1株能够稳定分泌抗人CD20的鼠单mAb的杂交瘤细胞株BDllF4，为进一步研究以CD20为靶点对非霍奇金淋巴瘤进行诊断治疗提供基础。
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