华癸中慢生根瘤菌7653R BacA互作蛋白的初步鉴定及功能研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiqi251305430
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本室前期工作中,以BacA为诱饵蛋白,从华癸中慢生根瘤菌7653R基因组细菌双杂交pTRG文库中筛选获得两个与其互作的蛋白CysW和TypA。CysW是硫转运系统CysATWP-Sbp中的一个内膜元件,参与硫的跨膜转运:TypA为GTP结合蛋白,属于翻译GTPase,为一种调节蛋白。本研究工作围绕目标蛋白互作验证、基因突变与共生表型开展,取得了以下三个方面的实验结果:其一,发现TypA及其同源蛋白均具有三个保守的蛋白结构域,通过构建截短突变体和利用细菌双杂交体系,确定了TypA-BacA互作的关键结构域。研究结果表明在M. huakuii7653R中,完整的三个结构域是TypA-BacA互作的必要条件,TypA的第三个结构域在蛋白互作中发挥关键作用。同时还发现,外源根瘤菌和大肠杆菌的同源蛋白TypA/BipA与华癸根瘤菌BacA之间的互作也具有一定的互补性和差异性。其二,分别构建与获得了目标基因cysW、typA插入失活的华癸根瘤菌突变菌株、互补菌株。植物盆栽实验和共生表型检测表明:两种突变株与宿主共生时结瘤数量减少,根瘤含菌细胞数量少,固氮区基本不含类菌体,类菌体分化异常,固氮活性显著降低。同时,这些表型变化在所构建的功能互补菌株中均可以获得恢复。研究结果表明cysW和typA是类菌体分裂分化过程中的必要基因,其突变表型与bacA基因突变体具有高度的一致性。其三,试图利用了蛋白共表达和共纯化系统在大肠杆菌中表达三个目标蛋白:BacA、CysW和TypA,但是未获得预期的理想结果。上述研究结果提供了一定的证据支持TypA-BacA蛋白互作,进而介导类菌体分化的假设,为揭示bacA在介导类菌体分化应答过程的蛋白信号传递途径,提供了一定的实验依据。
其他文献
  燃烧反应是一个在高温高压条件下涉及大量的反应物分子、产物分子、中间体和自由基的多体碰撞、活化和反应的过程。即便是最简单的燃烧过程(例如氢气燃烧),在不同温度压力
会议
What is body language?Do you know?真实肢体语言就是指以身体的各种动作来代替语言达到与人沟通的目的。它包括眼神、走路姿势、站立的姿势以及手势,等等。每个国象都有各自丰
企业转制与党建工作冯雅辰安丹凤在党的十五大精神指引下,企业转制已成为一种势不可挡的潮流。对于县城企业的发展起到了极大的推动作用。股份制、股份合作制、私营企业必将大
  由于塑化剂能对人体的生殖系统等造成危害,该类物质受到越来越多的关注,塑化剂的分析和检测也成为近年来的研究热点。当前许多传统的仪器分析方法已经成功应用在塑化剂的检
会议
为适应新形势、新任务的要求,我公司各级党组织积极探索适应现代企业制度要求的思想政治工作管理体制和运行机制,在实践中初步形成了党委统一领导,党政共同负责,党政工齐抓共管,职
本研究针对Nafion等微相分离膜纳米相难以精准修饰问题,提出了基于量子点(QD)和分子水平杂化的功能化策略。基于尺寸和亲和力匹配将尺寸为2-5nm的QD准确分散于Nafion不同纳米相,实现分子水平杂化。开发原位分子水平杂化(热溶胀吸附-微波辅助缩聚)技术实现了商业Nafion膜离子纳米相的均匀连续修饰。分析了分子水平杂化的过程机制,揭示了膜微结构调控规律,提出了质子传递特性和阻醇特性强化的新方
学位
  我国北方内蒙古等地区有着面积广袤的沙地、沙漠,如何实现沙漠的绿化一直以来都是备受人们关注的难题.许多沙化地区降水较多,有利植物生长,但由于沙子保水性差,水会迅速
会议
  农田中的虫害严重危害着粮食的生产安全,虫害的防治离不开化学杀虫剂的使用。由日本住友化学公司研发的新型杀虫剂啶虫丙醚(英文名:Pyridalyl),就能够有效防治农田中的鳞翅
  腐植酸是一种具有三维空间结构的高分子芳系羟基羧酸,含有羧基、醌基、酚羟基和醇羟基等多种含氧活性官能团,对肥料具有增效作用,对农作物具有增产增质作用,对土壤和环境具有
会议
  本工作针对阿维菌素见光易分解,常用乳油剂型有机物使用量大且在不同植物叶面停留时间各异而造成利用率低下、使用量大和环境污染的问题[1],拟从仿生学角度出发,结合控制释
会议